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第一部分 益气活血通络方联合针刺治疗非动脉炎性前部缺血性视神经病变的临床观察目的:观察益气活血通络方联合针刺法治疗非动脉炎性前部缺血性视神经病变(nonarteritic anterior ischemic optic neuropathy, NAION)的临床疗效。方法:对65例(88只眼)非动脉炎性前部缺血性视神经病变患者,给予益气活血通络方药水煎内服和针刺相关腧穴治疗,观察患者治疗前与治疗2周、4周、8周后的视力、视野以及治疗前与治疗8周后的视觉诱发电位(visual evoked potential, VEP)的变化。结果:(1)视力:与治疗前对比,治疗2周、4周、8周后视力均有不同程度的提高,其有效率分别为40.91%、60.47%、69.51%。(2)视野平均缺损值(mean defect, MD)、视野平均光敏感度(mean light sensitivity, MS):与治疗前对比,治疗2周、4周、8周后MD均明显下降、MS均明显增高(P<0.01)。(3)VEP潜伏期和振幅:与治疗前对比,治疗8周后VEP-P100波的潜伏期明显缩短(P<0.05),振幅明显升高(P<0.05)。结论:益气活血通络方联合针刺治疗NAION疗效确切,能有效改善NAION患者的视力、视野、视觉诱发电位,防止视神经退行性损害继续加重,提高患者的视功能质量。第二部分益气活血通络方对糖尿病大鼠视神经组织保护作用的实验研究目的:非动脉炎性前部缺血性视神经病变的发生、发展与糖尿病(diabetes mellitus, DM)有密切的关系,因此,本研究在建立实验性糖尿病大鼠模型的基础上,通过观察益气活血通络方对糖尿病大鼠视神经形态学结构的影响,对神经微丝蛋白(neurofilament, NF)和少突胶质细胞髓鞘糖蛋白(oligodendrocyte myelin glycoprotein, OMG)表达的影响,探讨益气活血通络方对糖尿病大鼠视神经组织(diabetic optic neuropathy, DON)的保护作用。方法:选用SPF级六周龄雄性SD大鼠25只,除正常组6只外,其余大鼠经腹腔注射链脲佐菌素(Streptozotoein, STZ) (60mg/kg)诱导实验性糖尿病大鼠模型,注射72小时后尾尖静脉血糖连续3天≥16.7mmol/L者为DM大鼠模型。造模成功后的DM大鼠随机分为模型组7只,治疗组6只,对照组6只。治疗组和对照组大鼠在造模成功后即开始给药,给药时间为每日上午8-10时,给药途径为灌胃。其中,治疗组(炙黄芪、红参、茯苓、桂枝、丹参、三七粉、地龙等水煎,浓度为1g/ml)给药量为10g/(kg·d);对照组(多贝斯)给药量为250mg/(kg·d)。每隔2周监测大鼠体重、血糖变化。实验周期9个月。10%水合氯醛过量麻醉处死大鼠,摘取眼球及视神经,制备视神经组织切片,通过光镜、电镜观察糖尿病大鼠视神经的形态结构改变;应用免疫组织化学染色(Envision法)检测NF和OMG在视神经的表达,经图像分析软件测量免疫组化的显色强度并进行定量分析。结果:(1)血糖:造模前各组大鼠血糖无明显差异(P>0.05);大鼠成模后,与正常组相比,DM大鼠的血糖在各时间段均明显升高(P<0.01)。(2)体重:造模前各组大鼠体重无明显差异(P>0.05);大鼠成模后第6周开始,与正常组相比,DM大鼠的体重在各时间段均明显减轻(P<0.01)。(3)形态学观察:与正常组相比,模型组大鼠视神经的神经纤维排列紊乱,毛细血管扩张及出血,轴突内密度降低、微丝大量溶解、大量空泡样变,多数髓鞘结构松解或脱失,甚至无髓鞘,伴有大量胶质细胞增生;治疗组与模型组和对照组相比,神经纤维排列明显整齐,轴突退变、髓鞘脱失和胶质细胞增生的程度明显减轻。(4)NF在视神经的表达结果:与正常组相比,模型组、治疗组、对照组大鼠视神经NF阳性表达值明显降低P<0.01)与模型组相比,治疗组、对照组表达明显增加P<0.05);与对照组相比,治疗组表达明显增加(P<0.05)。(5)OMG在视神经的表达结果:与正常组相比,模型组、治疗组、对照组大鼠视神经OMG阳性表达值明显增加(P<0.01);与模型组相比,治疗组表达明显降低(P<0.05),对照组表达无显著差异(P>0.05);与对照组相比,治疗组表达明显降低(P<0.05)。结论1实验性糖尿病大鼠的视神经及坐骨神经均发生明显的病理性损害;2益气活血通络方对糖尿病大鼠视神经组织具有一定的保护作用;3益气活血通络方能增强糖尿病大鼠视神经NF的表达、抑制OMG的表达,有助于减轻轴突损害、促进轴突再生。