磁性CuFe2O4模拟蛋白酶及其对人卵巢癌细胞的作用

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蛋白酶是参与一切生命活动的一类具有催化活性的蛋白质,在洗涤、医药、食品、诊断治疗等领域都具有十分重要的应用。蛋白酶的应用广泛,但是,天然蛋白酶的成本高、反应条件苛刻、稳定性差,这些缺点限制了蛋白酶的应用。另外,癌症的诊疗也是医学研究的一大难题,卵巢癌是女性最容易患的癌症之一。因此,随着科学技术和研究水平的不断提高,一些新型的纳米材料被应用于模拟蛋白酶和抗癌领域的研究。本文主要以.磁性CuFe2O4为研究对象,探究了其模拟蛋白酶活性及其对人卵巢癌细胞的作用,主要内容包括:(1)CuFe2O4材料用于模拟蛋白酶催化水解牛血清白蛋白(BSA)和酪蛋白(Casein),探究了反应时间、反应温度和pH对水解效果的影响。实验结果表明CuFe2O4材料能够在pH为中性的条件下水解蛋白,并且随着时间和温度的增加水解效果增强。(2)CuFe2O4材料用于小鼠胚胎成纤细胞(BABL-3T3)、人卵巢癌细胞(SKOV3)、血管内皮细胞(HUVEC)、结肠直癌细胞(HT-29)和人非小细胞肺癌细胞(A549)的抑制增殖的检测实验,计算出CuFe2O4对不同肿瘤细胞的半抑制率(IC50)。结果表明CuFe2O4对四种肿瘤细胞的毒性都强于正常细胞,但是CuFe2O4对SKOV3的增值抑制效果最强,作用时间仅24 h时,IC50值为3.1μg·mL-1,且不随作用时间的增加而变化。(3)选择抑制效果最好的SKOV3为研究对象,做了迁移、凋亡和蛋白.印迹(Western Blot)分析,结果显示CuFe2O4通过下调基质金属蛋白酶MMP-9、MMP-2和肌动蛋白actin的表达抑制SKOV3细胞迁移。通过AO/EB染色及其流式分析进一步表明CuFe2O4能够诱导SKOV3细胞凋亡。
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