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棉花黄萎病是由大丽轮枝菌(Verticillium dahliae Kleb.)引起的一种危害性极大的维管束病害,是当前影响我国棉花产量和品质的主要病害之一。近年来,我国棉花黄萎病不断蔓延,危害逐年加重,被称为“棉花的癌症”。黄萎病在我国广大棉区的猖獗发生,使其已经成为我国棉花生产发展的主要障碍。因为棉花黄萎病是一种土传病害,所以利用物理化学手段进行黄萎病的防治效果甚微。目前许多学者开始主张通过生物防治的途径来防治棉花黄萎病。本试验从土壤中分离得到了芽孢菌29株,实验室已有113株芽孢菌,共有实验菌株142株。分别将这142株芽孢菌对棉3、V190进行拮抗菌筛选,共筛选出对棉3具有拮抗作用的菌株60株,对V190具有拮抗作用的菌株39株。其中编号为DS45-2的芽孢杆菌对V190表现出很强的拮抗活性。通过对拮抗菌DS45-2进行生长曲线测定,我们发现6-12h的种子培养基正处于对数生长期,最适于作种子液。采用不同的培养温度、不同的培养时间、不同的培养基和不同的pH值对拮抗菌DS45-2进行培养,对其发酵液的抗菌活性进行检测,得到了抗菌蛋白产生的最佳条件为：在pH8.0的LBG培养基中30°C摇床恒温培养48h后其抑茵效果最好。在碳源氮源的优化试验中我们选择不同种类的碳源,其中包括单糖类(葡萄糖、蔗糖、甘露醇)、双糖类(乳糖、麦芽糖)、多糖类(淀粉、糊精)等分别对拮抗菌DS45-2的发酵培养基进行单因子试验。从试验结果可以看出,拮抗菌DS45-2对单糖(葡萄糖、麦芽糖)的利用效率要明显的高于多糖(淀粉)。确定出最优碳源为葡萄糖,最佳浓度为4%。同法,我们确定出最优有机氮源组合为0.5%的酵母膏与1%蛋白胨。对其发酵液进行硫酸铵盐析,发现DS45-2的粗蛋白对棉花黄萎病具有拮抗作用；对其进行有机溶剂(氯仿)处理,发现其抗菌活性消失,初步认定其拮抗物质为蛋白质。通过粗蛋白的热稳定性和pH稳定性试验,我们发现其对热不敏感,pH6.0-8.0时较稳定。通过硫酸铵的分级沉淀、DEAE-Sephadex A-50离子交换层析和Sepharyl S-300分子筛凝胶层析以及聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法,发现DS45-2菌株的发酵液中有多种对棉花黄萎病菌具有拮抗作用的抗菌蛋白。