[目的]　　 通过融合蛋白技术，将肿瘤组织高表达的基质金属蛋白酶(matrixmetalloproteinases，MMPs)的底物序列作为融合肽段，与hTNF-α构建成为具有靶向性的重组hTNF-α融合蛋白，并将其纯化，利用生物信息学手段对其结构和理化性质做出预测和分析。　　 [方法]　　 把本课题组先前构建的融合蛋白质粒转化到大肠杆菌表达菌Rosette2中，分别表达、纯化出四种带有GST标签的foldon-MMPs-hTNF-α，经Western Blot鉴定，再用凝血因子(Factor Xa)切除载体GST标签；利用非变性凝胶电泳检测去标签后各蛋白在体外形成三聚体的情况；分别用基质金属蛋白酶MMP-1、MMP-8、MMP-2和MMP-9酶切相应的融合蛋白；最后利用Chromas2、Antheprot、Cn3D等软件，对其结构和理化性质进行预测和分析。　　 [结果]　　 经诱导得到可溶性融合蛋白，成功切除GST标签。并初步验证了基质金属蛋白酶(MMP-1、MMP-8和MMP-2、MMP-9)对融合蛋白的去封闭效果。融合蛋白的一级结构未发生改变，其理化性质除等电点外基本与单独的融合肽段保持一致，且能形成TNF的三聚体活性形式。　　 [结论]　　 融合肽段对hTNF-α的生物活性没有造成影响，经实验和分析验证，融合蛋白foldon-MMPs-hTNF-α有标准TNF的活性，并能在体外自主形成三聚体的活性形式。