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第一部分PLCε shRNA通过PKCα/β/TBX3/E-cadherin信号通路抑制膀胱癌细胞的侵袭和迁移目的：体外实验研究PLC调节膀胱癌细胞侵袭和迁移的分子机制。方法：各处理因素作用于膀胱癌细胞株T24、BIU-87细胞后，采用划痕，transwell迁移、侵袭实验检测细胞的迁移、侵袭能力；QRT-PCR检测TBX3，E-cadherin的mRNA表达水平；Western blot检测PLC，PKC，PKCβ，p-PKC，p-PKCβ, TBX3和E-cadherin的蛋白表达水平；IHC检测膀胱癌组织中PLC，PKC，PKCβ的蛋白表达水平。结果：划痕，transwell迁移、侵袭实验显示：Ad-shPLC能够抑制膀胱癌细胞的迁移、侵袭能力。Western blot结果显示Ad-shPLC使PKC、PKCβ在细胞膜的分布减少，降低PKC、PKCβ的磷酸化水平。Western blot和IHC结果显示：PLC高表达膀胱癌组织与PLC低表达的膀胱癌组织相比较，PKC、PKCβ的磷酸化水平及在细胞膜的表达升高。Western blot和QRT-PCR结果显示：Ad-shPLC能够抑制TBX3的mRNA、蛋白表达，促进E-cadherin的mRNA、蛋白的表达。Ad-shPLC联合运用pGenesil-shTBX3处理细胞后，能够进一步增加E-cadherin的表达，抑制细胞的迁移；Ad-shPLC联合PKC、PKCβ的特异性抑制剂GO6976处理细胞后,较Ad-shPLC处理组，TBX3表达降低，E-cadherin表达增高，细胞的迁移、侵袭能力受到明显的抑制；Ad-shPLC联合PKC激活剂PMA处理细胞后，能够减少Ad-shPLC对细胞的迁移、侵袭能力得抑制作用，并能部分增加TBX3的蛋白表达及部分降低E-cadherin的蛋白表达水平。结论：PLC shRNA能够通过PKC/β/TBX3/E-cadherin通路抑制膀胱癌细胞的迁移、侵袭能力。第二部分PLCε shRNA对膀胱癌裸鼠移植瘤生长的影响及抑制膀胱癌侵袭和迁移机制的验证目的：体内实验研究PLC shRNA对膀胱癌裸鼠移植瘤生长的影响及验证PLC shRNA抑制膀胱癌侵袭和迁移的机制方法：将感染Ad-shPLC，Ad-HK及空白膀胱癌T24细胞分别种植于随机分的三组裸鼠皮下(每组3只)，形成膀胱癌皮下移植瘤，并定期监测裸鼠体重及瘤体体积，四周后处死裸鼠，切取瘤体，切片行H&E染色及免疫组化检测PLC，ki67, p-PKC，p-PKCβ, TBX3和E-cadherin的蛋白表达情况。结果：以3×106T24细胞种植于裸鼠皮下成功成瘤，感染Ad-shPLC T24细胞处理组肿瘤重量明显小于空白组及Ad-HK组，差异有统计学意义（p<0.05）；免疫组化结果显示，Ad-shPLC处理组与空白组、Ad-HK处理组比较, E-cadherin表达升高，PLC,ki67, p-PKC，p-PKCβ, TBX3表达降低。结论：PLC shRNA能够抑制裸鼠皮下瘤的生长，并上调E-cadherin及下调ki67, p-PKC，p-PKCβ, TBX3的表达。