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目的目前关于胃癌发生机制的研究主要集中于细胞和分子生物学水平,包括抑癌基因在内的肿瘤相关基因的失活在胃癌的发生发展过程中发挥重要作用。基因的失活方式有很多,而启动子区CpG岛的异常甲基化被认为是除突变和缺失以外导致抑癌基因失活的重要机制之一,可能在胃癌的发生发展过程中发挥着重要作用。本实验通过检测胃癌患者癌组织、相应的癌旁5cm正常组织以及良性胃黏膜组织中p16和DAPK基因启动子CpG岛的甲基化水平,探讨这些基因启动子异常甲基化在胃癌发生发展中的作用。同时通过检测胃癌组织中基因的蛋白表达水平,了解基因高甲基化与其蛋白表达缺失之间的关系。方法收集三组组织标本,分别是胃癌组织、相应的癌旁5cm正常组织各123例,良性胃黏膜组织(浅表胃炎或正常胃粘膜) 30例作为对照。常规酚/氯仿法抽提组织标本的基因组DNA,经过亚硫酸氢盐处理,采用目前常用的甲基化特异性PCR (Methylation-specific PCR,MSP)方法检测上述三组标本中p16基因和DAPK基因启动子CpG岛甲基化的状况并分析每个基因甲基化程度与临床参数之间的关系。采用免疫组织化学方法检测胃癌组织标本中p16和DAPK基因的蛋白表达水平,进一步探讨基因启动子高甲基化与其蛋白表达之间的关系。结果30例良性胃黏膜组织中没有检测到基因的异常甲基化。123例胃癌组织中p16和DAPK基因的甲基化发生率分别是:69.1% (85 /123)、64.2% (79/123),而相应的癌旁5cm正常组织中,p16和DAPK基因的甲基化率分别是:7.3% (9/123)、34.1% (42/123),两个基因甲基化阳性率在胃癌组织与癌旁正常组织之间的差异均具有统计学意义( both P<0.05 )。且癌旁组织中p16和DAPK基因的甲基化状况与癌组织之间具有明显的一致性(Kp16=0.068, KDAPK=0.448, both P<0.05)。胃癌组织中p16基因启动子区的甲基化程度与肿瘤分化程度、浸润深度及淋巴结转移程度相性(P<0.05),DAPK基因启动子区的甲基化程度与肿瘤分化程度、淋巴结转移相关(P<0.05)。此外,癌组织中p16和DAPK基因的蛋白表达水平与其甲基化水平呈明显的负相关性。结论胃癌中p16和DAPK基因启动子异常高甲基化是一个频繁事件,基因启动子高甲基化是导致其蛋白表达缺失的重要机制之一,可能在胃癌的发生发展过程中起到重要作用。胃癌组织中p16和DAPK基因启动子高甲基化可能作为评估胃癌恶性程度和淋巴结转移程度的有效分子生物学指标。