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桃果是我国重要的经济型水果。桃果采后易遭受病原菌的侵染而导致腐烂,造成严重的经济损失。匍枝根霉(Rhizopus stolonifer)引起的软腐病是桃果采后的主要病害之一。本论文以桃果为研究材料,筛选对其软腐病具有控制作用的拮抗酵母,揭示其控制的生理机制,并利用转录组技术分析其诱导桃果抗病性的分子机制。此外,对该拮抗酵母液体制剂和固体制剂的制备条件进行了优化。论文主要研究结果如下:(1)从采集的样品中筛选到4株对桃果采后软腐病具有控制作用的菌株(Y1,Y2,Y3和Y4),其中Y4处理的桃果贮藏72 h后,腐烂率和腐烂直径分别为26.23%和11.60 mm,显著低于对照(95.70%和35.72 mm),控制效果最明显。形态学观察和分子生物学鉴定结果表明,Y4为膜醭毕赤酵母(Pichia membranaefaciens)。小鼠急性毒性试验表明该酵母为实际安全无毒类酵母。(2)用不同浓度的P.membranaefaciens Y4处理桃果,结果表明,不同浓度的P.membranaefaciens Y4均能显著降低桃果软腐病的腐烂率和腐烂直径。相比于对照,1×10~8 cells/mL的P.membranaefaciens Y4处理桃果的自然腐烂率降低了19.44%,并对其他品质指标无显著不良影响。该拮抗酵母对R.stolonifer孢子萌发的抑制作用试验、在桃果上的生长动态及其处理后桃果内4种抗性酶活性和丙二醛(MDA)含量的测定结果表明,该拮抗酵母控制桃果采后软腐病的生理机制主要有以下几个方面:(1)可直接抑制R.stolonifer孢子的萌发(孢子萌发率降低了46.82%);(2)可与病原菌竞争空间和营养来抑制病原菌的生长;(3)能诱导提高桃果防御相关酶,如多酚氧化酶(Polyphenol oxidase,PPO)、过氧化物酶(Peroxidase,POD)、苯丙氨酸解氨酶(Phenylalanine ammonia lyase,PAL)和过氧化氢酶(Catalase,CAT)活性,从而增强桃果对采后病原菌的抗性。(3)利用转录组技术研究P.membranaefaciens Y4诱导桃果抗病性的分子机制,结果表明,P.membranaefaciens Y4处理的桃果共有796个显著差异基因(Differentially expressed genes,DEGs),其中上调的有391个,下调的有405个。通过对上述DEGs进行GO分析和KEGG分析,初步揭示了P.membranaefaciens Y4诱导桃果抗病性的分子机制主要包括以下几方面:(1)通过诱导桃果抗性物质如萜类、类黄酮和木质素等合成相关基因,如GGPS、PAL1、CHS1、PKS5、DFR、ANS、CYP75B2、PNC1和ROMT等的表达,从而提高桃果的抗病能力;(2)通过诱导提高桃果ET、JA和SA合成和信号转导途径中的一些转录因子基因,如ERF115、MYC4、WRKY18、WRKY53和WRKY33等的表达,从而激活下游防御基因的表达,如病程相关蛋白(pathogenesis-related proteins,PR)PR-1,PR-3和抗过敏蛋白(PR-10)的编码基因等,从而提高桃果的抗病性;(3)通过影响植物-病原菌互作途径中的重要基因的表达,如RBOHA的下调表达、MUK11.19和CML48的上调表达来降低桃果的氧化损伤以及影响桃果的超敏反应、细胞壁增强和气孔关闭过程,从而增强桃果对病原菌的抵抗能力。(4)通过正交试验优化了P.membranaefaciens Y4液体制剂的制备条件。结果表明,液体制剂保护剂的最佳配方为5%海藻糖、0.12%抗坏血酸和5%甘露醇,制备的液体制剂在25℃条件下保存15 d后存活率为52.30%(对照为32.13%);在4℃条件下保存90 d后,制剂中酵母存活率为50.98%(对照为10.66%)。通过单因素试验优化的喷雾干燥条件为:壁材比例(阿拉伯胶:海藻糖=1:1)、壁材质量浓度100 g/L、雾化压强200 kPa、进风温度100℃和进料速率15 mL/min。在该条件下制备的P.membranaefaciens Y4固体制剂于常温(25℃)和4℃下保存90 d后,酵母的存活率分别为66.97%和82.91%,该酵母固体制剂处理可显著降低桃果采后软腐病的腐烂率(37.04%),略高于新鲜酵母处理组(31.48%)。