脱脂黑水虻虫粉在大黄鱼幼鱼配合饲料中的应用研究

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本研究首先对脱脂黑水虻虫粉的营养组成及表观消化率进行测定,然后用不同水平的脱脂黑水虻虫粉替代鱼粉蛋白制成配合饲料对大黄鱼幼鱼进行饲养试验,研究脱脂黑水虻虫粉替代鱼粉对大黄鱼幼鱼生长、饲料利用、消化酶活性、肌肉营养成分、血清生化指标、肝脏抗氧化酶活性及蛋白代谢相关基因表达量的影响。试验设计6组等氮(粗蛋白45%)等脂(粗脂肪10%)饲料,用脱脂黑水虻虫粉分别替代饲料中0%、20%、40%、60%、80%和100%的鱼粉蛋白,分别记为G0、G20、G40、G60、G80和G100。选用2160尾平均体质量为(50.08±3.31)g大黄鱼幼鱼随机分为6组,每组3个重复,每个重复120尾鱼,在室内水泥池(2m×1m×1m)进行为期7周的投喂试验。试验结果如下:1)脱脂黑水虻虫粉的营养成分测定及表观消化率研究。经测定本研究所使用脱脂黑水虻虫粉干物质中粗蛋白含量为37.78%,粗脂肪含量为11.37%,粗灰分含量为12.47%。必需氨基酸中的缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、赖氨酸含量较高,蛋氨酸含量较低。非必需氨基酸中的谷氨酸、酪氨酸、丙氨酸及天冬氨酸含量较高,必需氨基酸总量与氨基酸总量比值为0.46。大黄鱼幼鱼对脱脂黑水虻虫粉干物质、粗蛋白和粗脂肪的表观消化率分别为60.27%、81.25%和82.13%。2)脱脂黑水虻虫粉替代鱼粉对大黄鱼幼鱼生长、饲料利用和消化酶活性的影响。大黄鱼幼鱼增重率、特定生长率、饲料效率及蛋白质效率均随着饲料中脱脂黑水虻虫粉替代鱼粉蛋白水平的提高呈现先升高后下降的趋势,其中以替代40%鱼粉蛋白组(G40组)为最高,显著高于对照组(G0组)(P<0.05)。鱼粉完全替代组(G100组)为最低,显著低于G0组(P<0.05)。随着替代水平的上升,大黄鱼幼鱼肝体比和脏体比呈现上升趋势。替代水平≥60%时大黄鱼幼鱼肠道淀粉酶活性显著增强;脂肪酶与胰蛋白酶活性从G0组开始均呈现先升高后降低的趋势,G40组大黄鱼幼鱼肠道脂肪酶活性最高,显著高于G0组(P<0.05)。G100组大黄鱼幼鱼肠道脂肪酶活性最低,G20组大黄鱼幼鱼肠道胰蛋白酶活性最高,随着替代水平的升高,肠道胰蛋白酶活性显著降低(P<0.05)。3)脱脂黑水虻虫粉替代鱼粉对大黄鱼幼鱼肌肉营养成分的影响。随着脱脂黑水虻虫粉替代鱼粉蛋白水平的提高,大黄鱼幼鱼肌肉粗蛋白含量呈现下降趋势,饲料中鱼粉蛋白替代水平≥40%时鱼体粗蛋白含量显著降低(P<0.05);粗脂肪和粗灰分含量呈升高趋势,替代水平≥60%时鱼体粗脂肪和粗灰分含量显著升高(P<0.05)。脱脂黑水虻虫粉替代饲料中20%鱼粉蛋白(G20组)时大黄鱼幼鱼肌肉中必需氨基酸总量(TEAA)、非必需氨基酸总量(TNEAA)及氨基酸总量(TAA)均最高。但随着脱脂黑水虻虫粉替代鱼粉蛋白水平的提高,肌肉中蛋氨酸与组氨酸与G0组相比下降较明显,肌肉必需氨基酸总量(TEEA)呈现下降趋势,且显著低于G0组(p<0.05)。随着替代水平的提高,大黄鱼幼鱼肌肉中饱和脂肪酸总量(ΣSFA)显著升高,替代水平≥20%时肌肉ΣMUFA、EPA和DHA含量显著降低(p<0.05);替代水平≥40%时肌肉中多不饱和脂肪酸总量(ΣPUFA)显著下降(p<0.05),至G100组降到最低(30.07%),显著低于其他替代组(p<0.05)。4)脱脂黑水虻虫粉替代鱼粉对大黄鱼幼鱼血清生化指标及肝脏抗氧化酶活性的影响。随着饲料中脱脂黑水虻虫粉替代鱼粉蛋白水平的增加,大黄鱼幼鱼血清谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)活性和葡萄糖(GLU)水平呈现上升趋势,G20组和G40组之间血清ALT和AST活性差异不显著(P>0.05),但均显著低于较高水平替代组(P<0.05);血清中甘油三酯(TG)水平以G40为最高并且显著高于其他组(P<0.05);鱼粉蛋白替代水平≥40%时大黄鱼幼鱼血清高密度脂蛋白(HDL)水平显著降低(P<0.05),替代水平≥60%时血清低密度脂蛋白(LDL)和胆固醇(CHOL)水平则显著降低(P<0.05)。血清钠离子(Na+)和钾离子(K+)水平整体呈现先上升后下降再上升趋势,高水平替代组(≥60%)大黄鱼幼鱼血清钙离子(Ca2+)水平显著降低(P<0.05)。G20组大黄鱼肝脏总抗氧化能力(T-AOC)及G40组肝脏超氧化物歧化酶(SOD)活性均为最高;G40组大黄鱼肝脏丙二醛(MDA)含量最低;过氧化氢酶(CAT)活性随着鱼粉蛋白替代水平的提高呈现下降趋势,替代水平≥40%时CAT活性显著下降(P<0.05)。5)脱脂黑水虻虫粉替代鱼粉对大黄鱼幼鱼蛋白代谢相关基因表达量的影响。G0组及G40组大黄鱼肝脏和肌肉均只检测到微量PepT1基因表达,G100组大黄鱼幼鱼肝脏、肠道和肌肉中PepT1基因的表达量均显著高于G0组及G40组(P<0.05),G0组与G40组大黄鱼幼鱼各组织中PepT1基因表达量之间差异不显著(P>0.05)。G40组大黄鱼肝脏和肠道中Trypsin基因表达量显著高于G0组及G100组(P<0.05),G0组和G100组大黄鱼肌肉中Trypsin基因的表达量极低,G40组仅检测到微量的表达。G0组和G40组大黄鱼肌肉及肝脏中CCK基因的表达量很低,G100组大黄鱼肝脏、肠道及肌肉中CCK表达量显著高于G0组和G40组(P<0.05),但G0组和G40组之间差异不显著(P>0.05)。G100组大黄鱼肝脏、肠道和肌肉TOR基因表达量都显著高于G0组和G40组(P<0.05),G0组和G40组大黄鱼肝脏、肠道和肌肉中TOR基因表达量差异不显著(P>0.05)。综合以上研究结果认为:在本试验条件下,大黄鱼幼鱼饲料中脱脂黑水虻虫粉替代鱼粉蛋白的比例以不超过40%为宜。
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