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背景:多药耐药(multidrug resistance,MDR)是指肿瘤对未接触过的、结构不同、靶位各异的多种抗肿瘤药物也具有交叉耐药性。它是恶性肿瘤化疗治疗失败的主要原因。MDR产生的机制常同时存在,但以一种为主,且不同机制间常相互影响。近年来,葡萄糖神经酰胺合成酶(glucosylceramide synthase,GCS)介导的凋亡调控与MDR方面的研究引起了人们的关注。 GCS催化UDP-glucose上的糖基与神经酰胺相结合,使细胞逃避神经酰胺介导的促凋亡作用,对MDR的产生具有重要作用。神经酰胺,是由细胞膜神经鞘磷脂水解产生的一种脂质分子,是介导细胞凋亡的第二信使,参与了肿瘤细胞对于化疗和放疗的反应。神经酰胺的缺失是导致细胞对TNF-α,离子射线和阿霉素诱导的凋亡抵抗的一个原因。GCS糖基化产物葡萄糖神经酰胺(Glucosylceramide,GlcCer)在耐药肿瘤细胞表达水平明显升高,抑制神经酰胺的糖基化可以逆转对化疗药物的耐药性。许多化疗药物可以抑制GCS的活性并增加细胞内神经酰胺的合成。如PPPP(1-phenyl-2-hexadecanoylamino-3-pyrrolidino-1-propanol),PDMP(1-phenyl-2-dsdecanoylamino-3-morpholino-1-propanol)和cyclosporin A。但在临床实验中这些药物特异性不高,且具有毒副作用,限制了其进一步应用。因而开发低毒、高效的MDR逆转剂成为临床治疗的需要。以往的研究中,反义寡核苷酸(ASODN)、核酶均已显示出逆转MDR的效果。 RNA干扰(RNA interference,RNAi)是一种新兴的有效的分析基因功能的工具。通过导入细胞双链RNA(dsRNA)而导致序列特异性的基因沉默。RNAi是由dsRNA引起的,dsRNA可以被一种具有RNaseⅢ样活性的dsRNA特异性核酸内切酶(dsRNA specific endonuclease,Dicer)作用下被切割成21~23bp的RNA片段,即小干扰RNA(siRNA)。siRNA接着与RNA诱导的沉默复合物(RNA-induced silencing complex,RISC)结合,序列特异性的识别和切割目的mRNA。此外,短发夹状RNA(shRNA)在结构上与siRNA相似,也能够引发RNAi的