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MicroRNAs(miRNAs)是一类内源性非编码小分子RNA,通常在转录后水平负调节靶基因表达,在植物生长发育的每个阶段都发挥着不可或缺的作用。miR156是一类进化上高度保守的miRNA家族之一,马铃薯Stu-miR156包含11个成员,调控靶基因SPL家族广泛参与植物的生长发育、激素应答、逆境胁迫响应和光合作用等代谢过程。但关于miR156对马铃薯生长发育和响应干旱胁迫的研究很少。本研究通过amiRNA技术和STTM技术构建马铃薯Stu-miR156过表达载体和沉默表达载体Stu-miR156STTM,转化马铃薯栽培品种“Desiree”获得转基因植株。qRT-PCR分析转基因植株中Stu-miR156及靶基因StSPL9的表达量,统计分析侧根数量及侧根长度,为进一步研究miR156/SPLs模块参与调控马铃薯侧根发育提供理论依据。本研究取得的主要结果如下:1.马铃薯Stu-miR156生物信息学分析表明有11条前体序列,加工形成16条成熟序列。通过靶基因在线预测工具psRNATarget发现靶基因StSPL9第1296-1316个碱基处被Stu-miR156靶向结合。2.构建靶基因StSPL9植物瞬时表达载体pCAM-GFP-SPL9并注射本氏烟草。激光共聚焦显微镜观察荧光分布情况,结果显示pCAM-GFP定位于细胞膜、细胞核和细胞质,pCAM-GFP-SPL9初步判断定位于细胞质和细胞核。3.利用人工miRNA技术构建马铃薯pCPB121-miR156过表达载体,以马铃薯栽培品种“Desiree”无菌苗为实验材料,利用农杆菌转化马铃薯试管苗获得转基因植株。qRT-PCR分析Stu-miR156及靶基因StSPL9在转基因植株根、茎和叶中的表达量。结果表明:Stu-miR156在转基因植株根、茎和叶中表达量均上调。而靶基因StSPL9在根、茎和叶中表达量均下调,说明Stu-miR156负调控靶基因的表达,从而参与马铃薯生长发育。4.根据STTM的茎环结构设计引物,以BamHⅠ和HindⅢ为酶切位点,构建沉默表达载体Stu-miR156STTM并转化马铃薯获得转基因植株。qRT-PCR分析Stu-miR156及靶基因StSPL9在转基因植株根、茎和叶中的表达量。结果表明:Stu-miR156在转基因植株中均下调表达,而靶基因StSPL9均上调表达量,说明STTM技术高效沉默miRNA的表达。5.每个转基因株系分别随机选取3株,统计分析侧根数目、侧根长度和株高等发现:与野生型相比,过表达Stu-miR156转基因植株侧根数量显著增加,根长和株高均显著性降低;而Stu-miR156STTM沉默表达转基因植株的侧根数目显著减少,茎秆变细,侧根长度和株高均降低,说明miR156调控植物生长发育。