环境中过多甾体激素而产生的健康问题,备受人们关注,睾丸酮丛毛单胞杆菌分泌的3α-HSD和3,17β-HSD是分解类固醇类反应中重要的两种功能酶。通过研究一些调节因子对3α-HSD和3,17β-HSD表达的调节,给甾体激素降解提供更多的理论依据。本文将TetR基因通过PCR技术从睾丸酮丛毛单胞杆菌全序列扩增出来。为了证明该基因的功能,将TetR克隆进pET-15b、pUC19、pK18这几种不同的表达载体并分别与带有3α-HSD和3,17β-HSD调控序列的质粒共转化,并用不同甾体激素诱导分析Tet R的表达调控作用。通过荧光检测和ELISA检测,发现在有TetR表达的共转化菌中,3α-HSD蛋白的表达量比没有转入TetR基因的细菌相比明显降低(在TetR作用下3α-HSD蛋白的表达含量降低了32.72%)。同样在有TetR表达的共转化菌中3,17β-HSD蛋白的表达量比没有转入TetR基因的细菌相比明显降低(蛋白表达量下降26.20%)。表明TetR是3α-HSD和3,17β-HSD的抑制子,TetR对3,17β-HSD的阻遏区域在P2处。且睾丸酮可以解除TetR蛋白对3α-HSD蛋白和3,17β-HSD蛋白表达的抑制作用。进一步制备TetR多克隆抗体,通过ELISA验证TetR蛋白表达不受甾体激素调控。