【摘 要】
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小鼠肝炎病毒(简称MHV)感染是一种严重危害小鼠生产的病毒性传染病,可引起小鼠致死性肝炎、脑炎和肠炎,对小鼠的饲养和发展造成巨大威胁。鼠群感染MHV多数情况下呈亚临床型感
【出 处】
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北京协和医学院(中国医学科学院) 北京协和医学院 中国医学科学院 清华大学医学部
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小鼠肝炎病毒(简称MHV)感染是一种严重危害小鼠生产的病毒性传染病,可引起小鼠致死性肝炎、脑炎和肠炎,对小鼠的饲养和发展造成巨大威胁。鼠群感染MHV多数情况下呈亚临床型感染,对实验研究产生严重的干扰作用。因此,研制特异、快速、简便的诊断试剂盒对鼠群进行MHV的监测,将是预防和控制MHV感染的有效措施。本试验利用抗MHV(毒株MHV-JHM及MHV-A59)抗体探针建立检测MHV的胶体金免疫层析方法。利用柠檬酸三钠还原法分别制备粒径约为20nm和15nm的胶体金；设计方阵实验测得并测得稳定0.5ml胶体金最低抗体量为5.05μg；选用M135作为本实验的层析材料;并选用3%BSA作为封闭液；实验确定检测线抗体蛋白最适包被量为640μg/ml左右,质控线抗体蛋白包被浓度为800μg/m1左右。我们用均一性好的20 nm的胶体金标记抗MHV(毒株MHV-JHM及MHV-A59)混合抗体,同时用此抗体和羊抗鼠IgG二抗包被M135硝酸纤维素膜分别作为检测线和质控线,与金标垫组装成试纸条,此方法能在10min之内特异的检测出含有MHV抗原的样品,即检测线和质控线显示两条红线,对于不含MHV抗原的样品则只显示质控线一条红线。结论胶体金免疫层析方法能快速,特异及稳定的检测出MHV抗原。
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