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CCDC152(Coiled-coil Domain Containing Protein 152)是含有卷曲螺旋(Coiled-coil)结构域的蛋白家族成员。CCDC152在高等哺乳动物中高度保守,但功能未知。生物信息学结构预测发现CCDC152的结构与酵母中的转录因子GCN4极度相似。卷曲螺旋结构域与细胞内重要的生物学功能息息相关,其中常作为转录因子来调控其他基因的表达。GCN4存在于酵母细胞核内,含有亮氨酸拉链式(bZIP)结构,此结构可与DNA相应的序列(TGAG/CTCA)相结合。一般而言,酵母中的GCN4通常以二聚体的方式特异性结合到DNA特定序列。细胞凋亡和细胞增殖是生物体基本的生命活动,对维持体内细胞数目的动态均衡有着重要的作用。凋亡的发生是一系列复杂过程的总和,涉及到多种凋亡相关基因的表达变化。免疫组织化学分析发现CCDC152在人类的胰腺癌细胞(Panc-1细胞)中高表达。转录组测序结果发现过表达CCC152后影响最大的一类基因属于GPCR(G Protein Coupled Receptor,GPCR)以及下游的信号系统这一大类家族,根据此依据探究在Panc-1细胞中CCDC152与GPCR信号系统的分子机制,本实验采用免疫组织化学、免疫印迹、细胞共定位等实验,证明含有卷曲螺旋结构域的蛋白家族成员CCDC152在细胞中的表达、定位,对Panc-1细胞中GPCR信号系统、Rho/ROCK信号系统、Hippo/YAP信号系统等具有抑制作用,是一个负调控的枢纽,抑制细胞的凋亡,促进细胞的增殖。本实验的实验结果如下:1.通过核浆蛋白的提取、细胞核共定位实验,证明了 CCDC152与GCN4-样,以二聚体的形式在细胞核内发挥作用。2.Panc-1细胞中,GnRH通过Gai路径诱导CCDC152的表达;CCDC152过表达并不同浓度GnRH处理,MTT实验发现细胞耐药性增强,而且CCDC152诱导的耐药作用与LY294002、Sulindac、Gefitinib、VPA抑制的信号转导有关,所以CCDC152对GnRH诱发的GPCR信号转导具有抑制作用。3.CCDC152过表达后对Rho/ROCK信号系统下游底物磷酸化水平的下调,以及CCDC152过表达后抑制细胞粘着斑的形成,证明CCDC152对Rho/ROCK信号系统起抑制作用。4.CCDC152过表达可下调Hippo/YAP信号中的CTGF蛋白和p-YAP蛋白的表达,证明CCDC152对Hippo/YAP信号起抑制作用;Wnt信号与Hippo/YAP信号系统联系密切,CCDC152过表达可下调Wnt信号中的DKK1蛋白表达,DKK1蛋白是Wnt系统中的负调控因子,因此表明CCDC152对Wnt系统可能具有促进作用。5.CCDC152位于核内,通过As2O3或MG-132诱导Panc-1细胞发现CCDC152在细胞核内发生降解,提取组蛋白发现CCDC152参与H3组蛋白修饰相关蛋白的表达,Westernblot结果证明CCDC152过表达对PML具有抑制作用。6.细胞迁移实验证明CCDC152过表达对细胞的迁移具有抑制作用。结论:CCDC152表达受GPCR信号的表达调节;CCDC152具有抑制Rho/ROCK信号系统的作用;CCDC152的表达对GPCR信号系统具有负反馈调节作用。