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目的探讨Wnt/β-catennin信号通路介导的淫羊藿苷(Icariin)调控BMSCs(SD大鼠)成骨-成脂双向分化。方法1.体外实验(1)用细胞增殖、毒性试剂盒(CCK-8)检测BMSCs在多种不同浓度Icariin的干预其增殖活性的强弱及是细胞产生毒性反应。(2)用RT-q PCR确定Icariin对成骨分化指标(ALP、COL1、RUNX2)的影响,使用碱性磷酸酶(ALP)染色试剂盒和茜素红染色试剂确定经Icariin干预后ALP的活性及强弱、是否钙结节的形成及形成量(3)用RT-q PCR确定Icariin对成脂分化指标(PPARγ、Adipsin、FABP4)的影响,使用油红O染色试剂确定脂滴的形成。(4)使用信号通路特异性抑制蛋白DKK-1联合Icariin进行干预,检测Icariin在BMSCs成骨-成脂分化的作用。(5)Western-blot及Immunofluorescence检测Icariin干预后Wnt信号通路关键蛋白P-GSK、β-catennin表达和定位情况。2.在体试验用12周龄C57小鼠做卵巢切除模拟绝经后骨质疏松(OVX),口服Icariin(25mg/kg,持续6周),用micro CT扫描确定小鼠股骨远端的骨小梁数目,H&E染色确定小鼠股骨远端的骨小梁及髓腔中脂滴的形成数量。结果1.在Icariin作用下,细胞的增殖能力得到增强2.Icariin能够促进BMSCs的成骨基因RUNX2、ALP、COL1表达、ALP及钙结节的形成;抑制成脂基因PPARγ、Adipsin、FABP4表达及脂滴的形成。DKK-1能够抑制Icariin的促成骨效应,拮抗Icariin的抑成脂效应。3.Icariin干预后能够上调GSK的磷酸化程度,促进β-catennin转入核内4.Micro CT提示Icariin的干预可以减少因卵巢切除后所导致的骨小梁数目减少;H&E染色提示Icariin干预可减少因卵巢切除后所导致的骨丢失,减少髓腔内脂滴的形成。结论Icariin能促进BMSCs的增殖,并通过上调RUNX2、ALP、COL1和下调PPARγ、Adipsin、FABP4来调控BMSCs的成骨成脂分化,Icariin调控BMSCs成骨成脂分化过程中经典Wnt信号通路的介导起着重要的作用。