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目的：
通过MOG抗原诱导方法建立EAE模型，模拟MS，并通过重组腺相关病毒血清型9（AAVPHP.eB）介导的β-arrestin1基因沉默二次建立模型。探究益肾解毒通络法干预动物模型。通过观察模型小鼠的一般情况，监测记录全程神经功能评分情况，镜下了解脑和脊髓组织的病理改变情况，免疫组化染色法观察蛋白H3、H4的表达量，并Western blot（免疫印迹）检测中枢神经组织匀浆中组蛋白H4水平变化。从而探究益肾解毒通络法调节组蛋白的机制，为探索表观遗传机制提供实验数据。
方法：
1、将72只C57BL/6雌性小鼠采取随机数字表法分为模型组(n=12)、空白组(n=12)、中药组(n=12)、激素组(n=12)、AAV-β组(n=12)、AAV-β+中药组(n=12)，将除空白组外的60只小鼠采用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白多肽免疫法复制实验性自身免疫性脑脊髓炎模型（即EAE模型）。其中AAV-β组、AAV-β+中药组在造模后均给予AAVPHP.Eb-Arrb1-RNAi系统性尾静脉注射。
2、生理盐水干预模型组、空白组、AAV-β组、醋酸泼尼松干预激素组、益肾达络饮干预中药组、AAV-β+中药组。
3、分别运用Western Blot、HE染色法和免疫组织化学染色法检测相应指标。
结果：
1.免疫后，空白组外其他各组小鼠陆续发病，情况渐重，出现毛色光泽度下降，活动力减弱，进食、饮水减少，体重开始出现波动。造模后第十四天后，小鼠神经功能评分基本达到最高，模型组表现最为突出，状态最差，神经功能评分最高。AAV-β组较模型组有所改善。中药组、激素组和AAV-β+中药组在各个指标中均表现良好。
2.HE染色结果：EAE模型各组别的小鼠在颈段和胸段脊髓组织都未见明显的结构异常，EAE各组别的小鼠的脑组织、脊髓组织腰段和骶段神经表现最为突出。免疫组化结果：模型组H3、H4的阳性表达量最高，强阳性最突出，其次为AAV-β组；激素组与AAV-β+中药组阳性表达量相近；空白组的阳性表达最低。Western Blot检测结果：各组小鼠脑组织中组蛋白H4的含量，模型组小鼠与正常组相比，脑组织中组蛋白H4的含量明显升高，差异有统计学意义（P＜0.05），脊髓中H4的表达，模型组高于AAV-β+中药组，具有显著差异性（P＜0.01）。
结论：
益肾解毒通络法可以减轻EAE的症状，改善中枢神经系统的炎性表达，降低总组蛋白H3、H4含量，影响组蛋白修饰调节基因转录，促进表观遗传的改变。其机制可能是通过抑制βarr1的基因表达阻滞其往下游信号的传递，从而影响组蛋白乙酰化酶的聚集，降低该区域乙酰化程度，最终影响基因的转录。益肾解毒通络法对脑组织的治疗干预作用强于脊髓。
通过MOG抗原诱导方法建立EAE模型，模拟MS，并通过重组腺相关病毒血清型9（AAVPHP.eB）介导的β-arrestin1基因沉默二次建立模型。探究益肾解毒通络法干预动物模型。通过观察模型小鼠的一般情况，监测记录全程神经功能评分情况，镜下了解脑和脊髓组织的病理改变情况，免疫组化染色法观察蛋白H3、H4的表达量，并Western blot（免疫印迹）检测中枢神经组织匀浆中组蛋白H4水平变化。从而探究益肾解毒通络法调节组蛋白的机制，为探索表观遗传机制提供实验数据。
方法：
1、将72只C57BL/6雌性小鼠采取随机数字表法分为模型组(n=12)、空白组(n=12)、中药组(n=12)、激素组(n=12)、AAV-β组(n=12)、AAV-β+中药组(n=12)，将除空白组外的60只小鼠采用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白多肽免疫法复制实验性自身免疫性脑脊髓炎模型（即EAE模型）。其中AAV-β组、AAV-β+中药组在造模后均给予AAVPHP.Eb-Arrb1-RNAi系统性尾静脉注射。
2、生理盐水干预模型组、空白组、AAV-β组、醋酸泼尼松干预激素组、益肾达络饮干预中药组、AAV-β+中药组。
3、分别运用Western Blot、HE染色法和免疫组织化学染色法检测相应指标。
结果：
1.免疫后，空白组外其他各组小鼠陆续发病，情况渐重，出现毛色光泽度下降，活动力减弱，进食、饮水减少，体重开始出现波动。造模后第十四天后，小鼠神经功能评分基本达到最高，模型组表现最为突出，状态最差，神经功能评分最高。AAV-β组较模型组有所改善。中药组、激素组和AAV-β+中药组在各个指标中均表现良好。
2.HE染色结果：EAE模型各组别的小鼠在颈段和胸段脊髓组织都未见明显的结构异常，EAE各组别的小鼠的脑组织、脊髓组织腰段和骶段神经表现最为突出。免疫组化结果：模型组H3、H4的阳性表达量最高，强阳性最突出，其次为AAV-β组；激素组与AAV-β+中药组阳性表达量相近；空白组的阳性表达最低。Western Blot检测结果：各组小鼠脑组织中组蛋白H4的含量，模型组小鼠与正常组相比，脑组织中组蛋白H4的含量明显升高，差异有统计学意义（P＜0.05），脊髓中H4的表达，模型组高于AAV-β+中药组，具有显著差异性（P＜0.01）。
结论：
益肾解毒通络法可以减轻EAE的症状，改善中枢神经系统的炎性表达，降低总组蛋白H3、H4含量，影响组蛋白修饰调节基因转录，促进表观遗传的改变。其机制可能是通过抑制βarr1的基因表达阻滞其往下游信号的传递，从而影响组蛋白乙酰化酶的聚集，降低该区域乙酰化程度，最终影响基因的转录。益肾解毒通络法对脑组织的治疗干预作用强于脊髓。