【摘 要】
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第一部分:c-CrkⅡ通过与C3G的相互作用介导3T3-L1脂肪细胞分化过程中早期信号传递;3T3-L1前脂肪细胞是在三种诱导剂(一种糖皮质激素,一种能够提升胞内cAMP水平的试剂和一种类
【出 处】
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中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所 中国科学院上海生命科学研究院
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第一部分:c-CrkⅡ通过与C3G的相互作用介导3T3-L1脂肪细胞分化过程中早期信号传递;3T3-L1前脂肪细胞是在三种诱导剂(一种糖皮质激素,一种能够提升胞内cAMP水平的试剂和一种类胰岛素生长因子受体的配体)的诱导下分化成为脂肪细胞.研究发现一种强烈的磷酸酯酶抑制剂——钒酸钠能够作用于脂肪细胞的分化早期过程从而抑制其分化,并使一种PTPHA2的底物即酪氨酸磷酸化的蛋白质p-c-CrkⅡ累积.将c-CrkⅡ的反义RNA转化细胞能够显著的降低细胞内c-CrkⅡ的表达水平并抑制脂肪细胞的分化.通过对一种能够结合c-CrkⅡ中SA3区域的蛋白质C3G的研究表明,c-CrkⅡ与C3G的结合与分化过程相关;而且c-CrkⅡ的磷酸化使得C3G不能同其SH3区域相结合.上述研究结构提示通过钒酸钠的c-CrkⅡ限制在磷酸化状态能够抑制其参与脂肪细胞分化前期过程的信号传递过程.第二部分:小鼠C3G mRNA两种选择性剪接形式的鉴定;以人C3G cDNA为探针,筛选小鼠3T3-L1前脂肪细胞系分化第5天的cDNA文库,发现两种形式的小鼠C3G cDNA.其中在较短形式的cDNA与较长形式相比中部有一个114碱基片断的缺失.RT-PCR的研究表明,这两种形式的mRNA在所有的组织当中均存在.序列比较显示小鼠和人的C3GcDNA有88﹪的同源性.小鼠C3G cDNA与基因组数据库比较发现缺失的114碱基对片断对应一个完全的外显子,这也通过以小鼠染色体DNA和cDNA分别为模板的PCR反应得到了证实.上述研究表明,小鼠C3G存在通过选择性剪接产生的两种mRNA和蛋白质.
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