中药软肝宁对肝纤维化大鼠TGFβ1、Smad2/3表达的影响

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目的 我国是乙型肝炎发病率较高的国家,肝炎不经有效治疗进展为肝纤维化是它的发展趋势之一,而肝纤维化经适当治疗后可逆转,本文通过测定Hyp、HA、TGFβ1和Smad2/3在四氯化碳(CCL4)致肝纤维化的Wistar大鼠肝组织中的表达,探讨中药方剂软肝宁的疗效。 材料和方法 选取体重160-260gWistar大鼠50只,雌雄各半,随机分为正常组、模型组、治疗组和预防组4组,除正常组外其余三组均用40%CCL4造模8周(0.2ml/100g)。预防组造模1周后中药灌胃,治疗组造模4周后中药灌胃(0.3ml/100g)。8周末处死大鼠留取肝脾组织,每组选取5个以上标本分别经HE染色后作病理分级,测定肝重及脾重并计算肝指数、脾指数以确定不同组别大鼠应用中药后的变化,应用碱水解法测定肝组织羟脯胺酸(Hyp);应用酶联免疫法(ELISA)测定肝组织透明质酸(HA)。应用链菌素亲生物素-过氧化物酶(S-P)免疫组化染色和免疫印迹法(WesternBlot)测定肝组织中TGFβ1和Smad2/3蛋白的表达,免疫组化抗体浓度为1:200,免疫印迹一抗浓度为1:400,二抗浓度为1:500,免疫组化染色和免疫印迹结果经计算机显微镜图像分析系统分析量化,所有实验数据用(?)±s表示,进行t检验。 结果 一般状态:8周末正常组同实验前,CCL4模型组实验结束时毛色变黄,
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