Livin基因沉默诱导大肠癌HT-29细胞凋亡及抑制增殖的实验研究

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目的:利用基因转染和RNA干扰技术,在大肠癌HT-29细胞株中建立Livin基因沉默体系,探讨其在诱导HT-29细胞凋亡及抑制细胞增殖方面的作用。  方法:将化学合成的Livin siRNA转染HT-29细胞株,RT-PCR测定转染前后Livin mRNA的表达水平,流式细胞仪检测转染前后细胞凋亡率的变化,MTT法观察Livin siRNA转染HT-29细胞抑制细胞增殖的生物学行为。  结果:转染Livin siRNA沉默效果最明显的是001链,LivinɑmRNA/β-actin mRNA表达水平的比值在24h时阴性对照组与Livin_001组相比较由0.55下降到0.29,48h表达量由0.56下降到0.31,Livin_001组24h和48h凋亡率分别为25.14%和19.04%,与对照组相比有统计学差异(P<0.05),细胞增殖抑制率在Livin_001 siRNA浓度为50nM时,24h抑制率为25.19%,48h抑制率为20.96%,均与对照组有统计学差异(P<0.05)。  结论:针对Livin的siRNA能够有效抑制大肠癌HT-29细胞株Livin mRNA的表达,诱导细胞凋亡,并能在一定程度上抑制细胞生长,为RNAi技术用于大肠癌的临床治疗提供一定的实验依据。
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