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本研究采用原位杂交技术(ISH) DAB法和免疫组化(IHC) EnVision法检测10例正常口腔黏膜、26例口腔白斑(OLK)和56例口腔鳞状细胞癌(OSCC)中HPV16/18感染状况,比较ISH和IHC两种检测方法的差异,分析HPV感染与OSCC临床病理资料间的相关性。IHC EnVision法观察其中树突状细胞(DC)分布和表皮生长因子受体(EGFR)表达情况,探讨其与OSCC临床病理资料间的相关性,评估HPV感染后局部免疫细胞变化和鳞状上皮增殖情况,进一步揭示HPV感染在OLK与OSCC发生、发展过程中的内在关系。 结果显示:ISH检测正常口腔黏膜、OLK、OSCC中HPV16/18-DNA阳性率分别为10.0%(1/10)、46.2%(12/26)、53.6%(30/56),IHC检测HPV16/18-Ag阳性率分别为0(0/10)、53.8%(14/26)、50.0%(28/56),两种检测方法无显著差异(P>0.05),但ISH较IHC检测HPV16/18阳性细胞染色深,背影清晰,对比度强;HPV16/18在OLK和OSCC中感染率显著高于正常口腔黏膜(P<0.05),而在OLK和OSCC间感染率无显著差异(P>0.05)。CD1a+DC的浸润程度在正常口腔黏膜(23.00±4.94)和OSCC(22.54±12.68)中均显著低于OLK(31.70±15.45)(P<0.05),在正常口腔黏膜和OSCC间无显著差异(P>0.05)。EGFR的阳性表达率在OLK(92.3%,24/26)和OSCC(75.0%,42/56)中显著高于正常口腔黏膜(10%,1/10)(P<0.05),在OLK和OSCC间无显著差异(P>0.05)。HPV的感染率在吸烟组(80.0%,16/20)显著高于非吸烟组(38.9%,14/36)(P<0.05),HPV感染率与患者的性别、年龄、TNM分期、组织学分化及淋巴结转移均无关(P>0.05)。OSCC中CD1a+DC浸润程度在高分化组(28.38±13.17)均显著高于中分化组(19.23±11.89)和低分化组(17.56±8.3)(P<0.05),而在中分化组和低分化组间无差异(P>0.05);在淋巴结转移组(17.73±10.16)明显低于未转移组(25.64±13.31)(P<0.05)。EGFR表达与患者的性别、年龄、TNM分期、组织学分化、淋巴结转移及吸烟等临床病理特征均无关(P>0.05)。OSCC中CD1a+DC浸润程度在HPV16/18感染组(16.80±10.47)明显低于未感染组(29.15±11.90)(P<0.05); HPV16/18感染与EGFR的表达无关(P>0.05)。 研究结论:采用ISH和IHC方法检测口腔黏膜内HPV16/18感染状况,结果均较准确、可靠;但ISH检测法特异性更强,灵敏性更高。OLK和OSCC的发病与HPV16/18感染有密切相关,HPV16/18感染可能是部分OSCC的发病因素之一。DC在OLK中数目增加,预示机体在其病变过程中可能会产生一定的免疫反应;随着OSCC的发生、发展,DC数目减少,其免疫活性可能受到抑制;HPV感染患者局部免疫功能低下,可能导致肿瘤免疫逃逸。EGFR可以作为检测OLK和OSCC中细胞过度增殖和癌变的重要辅助指标。