目的：　　收集温州医学院附属第一医院和温州市中西医结合医院2010年9月～2012年3月临床标本中分离的肺炎链球菌，分析其临床分布情况；微量肉汤稀释法检测肺炎链球菌临床常用抗菌药物的最低抑菌浓度(Minimal Inhibitory Concentration，MIC)；聚合酶链式反应(PCR)检测青霉素耐药菌株pbpla和pbp2b、pbp2x基因的突变和所有菌株毒力因子；分析青霉素结合蛋白氨基酸组成的改变，讨论与青霉素耐药性的关系。通过肺炎链球菌的临床感染现状、毒力情况，耐药机制的研究分析，为临床治疗、医院内感染监控和预防免疫提供依据。　　方法：　　1.收集2010年9月～2012年3月从温州医学院附属第一医院和温州市中西医结合医院的痰液、血液、脑脊液、脓液等各类标本中分离的肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)菌株72株，保存复活后，采用微量肉汤稀释法检测青霉素(penicillin)、四环素(tetracycline)、红霉素(erythrocin)、左氧氟沙星(lavo-ofloxacin)、头孢噻肟(cefotaxime)的MIC值。　　2.用聚合酶链式反应(PCR)法对青霉素耐药菌株pbpla和pbp2b、pbp2x基因进行扩增，扩增产物进行DNA测序。　　3.用聚合酶链式反应(PCR)法对所有肺炎链球菌进行毒力因子检测。　　结果：　　1.肺炎链球菌主要来源于痰液标本，共68株，占94.4％，其他来源包括脓液标本1株，脑脊液标本1株，血液标本2株；从患者来源看，62株分离自儿童患者标本，分别为支气管肺炎(20例)、肺炎(19例)、毛细支气管炎(5例)、麻疹(4例)等患者，以呼吸道疾病为主，且病种较为集中。10株分离自成人患者标本，疾病种类多样，且分散在个科室。　　2.临床分离株的肺炎链球菌对四环素、红霉素的敏感率已很低，分别为8.3％和2.8％)，左氧氟沙星仍保持高敏感率，达98.6％，头孢噻肟的敏感率为44.4％，对青霉素的敏感率为30.6％，72株菌中青霉素耐药株14株。学龄前和学龄后年龄组中分离的菌株对青霉素的敏感性存在差异。　　3.PBP1a氨基酸序列改变：14株青霉素耐药株中，13株菌在STMK区域有T371S替换；11株菌在SRNVP区域有P432T替换，1株菌在SRNVP区域有P432S替换。　　4.PBP2b氨基酸序列改变：14株菌SSNT区域均有T446A替换。　　5.PBP2x氨基酸序列改变：14株菌STMK区域有T338A替换、LKSGT区域有L546V替换。其中8株菌STMK区域中还包含M339F替换，即为T338A/M339F两位点变异。　　6.毒力因子的检测结果：72株肺炎链球中毒力因子LytA、Ply、PspA、PsaA和nanA阳性的菌株分别为70株(97.2％)、70株(97.2％)、8株(11.1％)、16株(22.2％)和72株(100％)。　　结论　　1.肺炎链球菌的临床分离菌株主要来源于儿童，大多引起呼吸道相关感染；成年患者中肺炎链球菌的标本分布来源呈多样性。符合肺炎链球菌致病特点、社区流行性特点。　　2.药物敏感试验显示，四环素、红霉素耐药率已很高；左氧氟沙星虽然具有较高的敏感性，但由于其在儿童中的副作用，限制了其临床应用；作为治疗肺炎链球菌感染的传统药物青霉素，耐药率已接近了70％，需引起关注。　　3.从青霉素耐药菌株的PBPs上3个氨基酸保守功能片段检测到了相关突变。突变位点能够降低PBPs和β-内酰胺类抗生素的亲和力，可以解释与青霉素耐药的相关性。　　4.临床肺炎链球菌携带多种毒力因子基因，了解了毒力因子的分布情况，为进一步研究和研制疫苗积累了辅助资料。