慢性乙型病毒性肝炎肝郁脾虚证与脾胃湿热证的代谢组学研究

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目的:  运用1H-NRM技术,对健康人与慢性乙型病毒性肝炎患者的血清进行全谱代谢组学分析,寻找该病肝郁脾虚证与脾胃湿热证的差异性代谢产物,进而从代谢组学水平上探讨该病肝郁脾虚证与脾胃湿热证的物质基础,为慢性乙型病毒性肝炎的中医辨证分型提供客观依据。  方法:  选择符合入组标准的慢性乙型病毒性肝炎患者肝郁脾虚证28例、脾胃湿热证30例,同时选择健康对照组49例。抽取受试者空腹12小时后静脉血,静置2小时后经过高速离心后留取血清,保存在-80℃冰箱,运用1H-NRM技术,先使用中心化换算(meancenterscaling)的数据标度换算方式进行主成分分析(PCA),其次通过SIMCA-P+软件(V11.0,UmetricsAB,Umea,Sweden)对归一化后的数据进行偏最小二乘法判别分析(PLS-DA)对模型有效性进行评判,再运用正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)对PLS-DA模型进行正交矫正处理,最后运用多元统计法分析差异性代谢标志物。  结果:  慢性乙型病毒性肝炎肝郁脾虚组、脾胃湿热组和健康对照组在PCA二维图上无明显差异,PLS-DA分析提示各组血样与健康对照组建立的模型是准确和可靠的,预测能力较好;OPLS-DA分析最大化地凸显了模型内部不同组别之间的差异;通过分析各代谢物相应的相关系数,得到有统计意义的代谢物,主要有葡萄糖、缬氨酸、酪氨酸、三甲胺、丙酮酸、N-乙酰糖蛋白、脂类化合物(L1-L8)、丙氨酸、乳酸、苯丙氨酸、赖氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、谷氨酰胺、甘油的脂质、肌酸、乙酰乙酸、甲基组氨酸。  结论:  (1)N-乙酰糖蛋白、酪氨酸和两种低密度脂蛋白(L2:CH3-(CH2)n-(LDL)和L1:CH3-(CH2)n-(VLDL&LDL))可能为慢性乙型病毒性肝炎肝郁脾虚证诊断的潜在标志物;L1和丙氨酸可能为慢性乙型病毒性肝炎脾胃湿热证诊断的潜在标志物;N-乙酰糖蛋白可能为慢性乙型病毒性肝炎区分两种证型的潜在标志物。(2)代谢组学方法能够区分慢性乙型病毒性肝炎肝郁脾虚证组与脾胃湿热证组,以及疾病组与健康对照组。不同证型之间可能确实存在生物标志物的差异,代谢组学有望为慢性乙型病毒性肝炎的中医辨证分型提供一定的客观依据。
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