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目的 早产是常见的产科并发症,占所有妊娠的7%-10%。在早产儿,新生儿呼吸窘迫综合症(Neonatal Respiratory Distress Syndrome,NRDS)的发病率及死亡率均显著增高,其重要原因是由于肺发育不成熟,造成肺表面活性物质缺乏。如何提高早产儿的生存率及生存质量,减少新生儿NRDS的发生,一直受到关注。迄今,人们在胎儿肺生长发育机理方面展开了大量研究,取得很多研究成果。在胎肺发育过程中,生长因子发挥了重要作用,它们通过自分泌和旁分泌方式控制发育肺的生长及分化。近来研究表明,瘦素(Leptin,LEP)与胎儿生长发育有密切关系,并很可能作为一种旁分泌生长因子影响胎儿肺的生长发育及表面活性物质的合成。 瘦素,这个于1994年被首次发现的肥胖基因编码产物,是由脂肪细胞或脂质成纤维细胞分泌的肽类激素。瘦素参与神经内分泌、摄食与能量代谢等生理功能的调节,还与胎儿生长、免疫功能、糖代谢等有关。现已证实,下丘脑、垂体、胰岛、睾丸、卵巢、子宫内膜、胎盘、心、肾及造血细胞均有瘦素受体表达。瘦素受体还广泛存在于胎儿脑、肝、肾、造血细胞等多数组织器官,推测其与胎儿生长发育有关。近年来,随着实验研究不断深入,瘦素与胎肺发育间的密切关系开始受到人们的广泛关注。瘦素和瘦素受体表达于多种动物的胎肺组织,并且瘦素受体表达于胎肺Ⅱ型细胞表面,参与表面活性物质的合成和胎肺成熟过程。在本研究中,我们检测了瘦素在胎肺组织中的表达情况及地塞米松对胎肺成纤维细胞瘦素表达的影响,以探讨瘦素与胎肺发育、瘦素与地塞米松促胎肺成熟作用之间的关系。 材料和方法 1.孕鼠的饲养:2月龄体重在230-260克的Wister大鼠以5:1的雌雄比例合笼,每日清晨阴道涂片,若显微镜下观察到长形钩头精子,则确定为妊娠0天(Embryonic fay0,E0)。 2.取材:分别于孕16、17、18、19、20、21天杀取仔鼠胎肺,组织于一0度冻存,以备进行胎肺组织瘦素水平测定。 3胎肺成纤维细胞原代培养及分组:取若干只孕鼠于孕18天在水合氯醛麻醉下,剖宫取胎,留取胎鼠肺组织,组织经胰酶消化,差别粘附等步骤后,获得原代胎肺成纤维细胞,分成对照组,地塞米松组(该组细胞以浓度为1 x10一SM地塞米松处理24小时)。 4应用半定量RT一PCR法测定瘦素在不同孕期鼠胎肺组织标本以及细胞样本中的表达。 5.统计学处理:数据以又土S表示,并进行t检验,P<0 .05有统计学意义。结果 1在实验中所收集的各孕期(E16一E21)胎肺组织样本中均有瘦素的表达,且瘦素的表达在孕16一17天,孕18一19天,孕20一21天有逐渐上升的趋势,各组间比较有显著差异。瘦素表达的高峰是孕20天。 2.胎肺成纤维细胞经地塞米松(1 xlo一SM)处理24小时后,瘦素表达水平明显高于对照组,P<0.05结论 1.鼠孕晚期胎肺组织中有瘦素的表达,且随着胎肺的发育有增加的趋势,故瘦素与胎肺的发育有密切关系。 2.地塞米松能刺激原代培养的胎肺成纤维细胞瘦素的表达增加,地塞米松促胎肺成熟作用的发挥可能与瘦素有关。