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目的研究CD4+CD25+调节性T细胞(Regulatory T cells, Tregs)对NK细胞肿瘤杀伤力的影响及Treg细胞介导的抗肿瘤免疫抑制的机制；初步探讨过继输注NK细胞逆转Treg细胞介导的抗肿瘤免疫抑制的作用。方法免疫磁珠分离法(MACS)分离得小鼠脾脏Treg细胞及NK细胞,用流式细胞术检测其纯度。以CD3/CD28单克隆抗体磁珠和重组小鼠白介素2(rmIL-2)联合刺激体外扩增Treg细胞,重组小鼠白介素15(rmIL-15)、rmIL-2以及氢化可的松联合刺激体外扩增NK细胞。将扩增后Treg细胞及NK细胞按不同比例混合淋巴细胞培养,MTT比色法检测NK细胞的杀伤活性。如之前研究中所报道的方法将B16-F10小鼠黑色瘤细胞细胞输注至Balb/c小鼠体内建立肺移植瘤模型,将荷瘤小鼠分为4组：A组)单独接种B16-F10小鼠黑色瘤细胞；B组)Treg细胞+B16-F10黑色素瘤细胞； C组)B16-F10黑色素瘤细胞+NK细胞；D组)Treg细胞+B16-F10黑色素瘤细胞+NK细胞。MTT比色法测定各实验组小鼠脾脏NK细胞的杀伤活性,并比较不同处理组小鼠肺部肿瘤结节数目。结果体外扩增后的Treg细胞对新鲜分选及扩增后的NK细胞活性均具有明显抑制作用(p<0.05),且抑制作用呈剂量依赖关系；A组荷瘤小鼠NK细胞活性低于正常小鼠,且B组荷瘤小鼠NK细胞活性较A组进一步降低(p<0.05)；D组荷瘤小鼠NK细胞活性高于A组和B组荷瘤小鼠,但仍低于正常小鼠组(p<0.05)。B组荷瘤小鼠肺部移植瘤数目(105.33±10.97)较A组明显增多(17±4.58)(p<0.01)；C组荷瘤小鼠肺部移植瘤数目(2.00±1.00)较A组(17±4.58)明显减少(p=0.037)；D组荷瘤小鼠肺移植瘤数目(79.00±8.54)较B组明显降低(105.33±10.97)(p--0.030),但仍高于A组荷瘤小鼠(17±4.58)(p<0.001)。结论体内种植肿瘤会抑制机体NK细胞活性；输注体外扩增Treg细胞能够通过抑制NK细胞发挥抗肿瘤免疫抑制；过继输注体外扩增NK细胞能够部分逆转Treg细胞介导的抗肿瘤免疫抑制。