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甲状腺激素应答蛋白Spot14(THIRSP)是一个小的酸性蛋白,它在较早前对肝细胞甲状腺激素活动的研究中发现。THRSP被认为是控制诸如肝脏、脂肪和乳腺等主要脂肪生成组织的脂肪表达的一种转录因子。THRSP已经在包括人、大鼠、小鼠和牛在内多个哺乳动物的基因组中发现,而且最近发现在一些非哺乳脊椎动物也有THRSP基因的拷贝,如鸡、鸭、蛙、鱼等。在鸡中,这个基因定位在1号染色体的197836316-197838040 bp处。该研究从以下4个部分进行阐述:
第一部分:通过生物软件Expasy的分析发现,鸡THRSPa基因序列包括一个乙酰辅酶A乙酰基转移酶的激活位点,据报道该酶是脂肪生成通路所必须的。结果暗示出鸡THRSPa是编码脂肪酸生物合成酶的基因的激活所必须的。
第二部分:在F2全同胞参考家系(杏花鸡×隐性白洛克鸡)中,利用单链构象多态性(SSCP)的方法对THRSPa基因的3个单核苷酸多态性位点G181A,C639T和G360A进行了分析。结果显示,G181A与出雏重、28天龄体重、35天龄体重等生长性状显著相关(P<0.05),而且它也与胸肉重显著相关(P<0.05)。GG基因型F2个体大于AG和AA基因型个体。C639T并不显著影响生长及脂肪的沉积,而G360A则与脂肪沉积显著相关(脂肪带宽(P=0.0349)、胸肉粗脂肪含量(P=0.0349))。
第三部分:A)对杏花鸡和清远麻鸡的表型记录和血清脂蛋白含量进行了统计比较。表型记录的结果显示出,这两个鸡品种的体重在同一性别的情况下差异显著(P<0.05)。
B)本文对THRSPa基因的插入/缺失标记与表型记录以及品种内的血脂和血清脂蛋白水平的关系进行了研究。结果显示,在早期生长中(5到6周龄),公鸡比母鸡有较高的脂蛋白比率。这就意味着在鸡的早期生物发育过程中,相对于母鸡而言,公鸡可能需要更多的胆固醇。本研究的数据表明,性别、年龄和品系将可能影响着THRSPa基因与脂蛋白代谢的关系。在体重、血脂水平和脂蛋白方面,公鸡与母鸡都显著不同。血清胆固醇和低密度脂蛋白水平在杏花鸡母鸡和清远麻鸡母鸡中显著不同。THRSPa基因的AB基因型与胆固醇和低密度脂蛋白湮水平显著相关,这暗示出THRSPa基因的插入/缺失标记(AB)基因型与脂质和脂蛋白相关。
第四部分:mRNA表达、注射葡萄糖和甲状腺激素对THRSPa基因在肺脏和腹脂中表达的影响以及葡萄糖和甲状腺激素处理的离体细胞培养。在注射葡萄糖和甲状腺激素的实验中发现,不注射甲状腺激素而只注射5.5mM或25mM的葡萄糖都能维持THRSPa基因在肝脏中的高表达。在动物试验和离体细胞培养试验中都表明THRSPa基因对葡萄糖和甲状腺激素都有反应,不过对葡萄糖的反应要比甲状腺激素的反应来得剧烈。
结论:THRSPa基因单核苷酸多态性与生长和脂肪沉积都相关。该基因影响脂质状况及脂蛋白。本试验表明THRSPa基因多态性可能作为标记应用于鸡的育种选择。因此,脂质状况(血脂和脂蛋白)以及它们与THRSPa基因在不同鸡品种之间的相关性需要更深入地研究