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病原微生物对自身生命活动的调控、进化集中体现在与宿主的相互作用、攻防博弈中。丁香假单胞菌番茄致病变种Pseudomonas syringae pv.tomato（Pst）是引起细菌性斑点病影响番茄产量和品质的病原微生物。P.syringae pv.tomato与其宿主植物番茄之间的相互作用也是研究病原微生物-植物相互作用的一个重要模式。Pto是植物识别、防御丁香假单胞菌的抗性蛋白。Pto可以识别结合病原菌注入植物细胞的效应蛋白AvrPtoB、AvrPto,并由此触发下游防御反应,最终在侵染部位产生超敏反应诱导组织坏死,防止病原菌的定殖和繁殖。因此,Pto成为病原微生物-植物相互作用的一个枢纽蛋白,但Pto介导的免疫途径的框架仍未完整阐明。本文通过克隆番茄Pti（Pto interaction protein）基因Pti4、Pti5和Pti6,分别构建植物瞬时表达载体,利用农杆菌介导方法在烟草叶片中进行表达,并进一步利用免疫共沉淀技术,在植物体系中检测它们与番茄Pto、病原菌效应蛋白AvrPtoB的相互作用。同时,通过Pti4、Pti5和Pti6基因载体构建、番茄遗传转化,获得过量表达转基因植株。通过病原菌Pst DC3000接种,检测Pti基因在番茄防御丁香假单胞菌侵袭中的作用。实验结果表明,利用所构建Pti4、Pti5和Pti6基因植物表达载体,在烟草中获得了预期大小Pti4、Pti5和Pti6蛋白,并在植物体系中验证了它们与Pto蛋白,及其活性突变体PtoY207D的相互作用,表明Pti蛋白参与Pto介导的植物免疫应答途径,但它们相互作用强弱的差异,则提示Pti4、Pti5和Pti6蛋白可能在具体功能作用中有所不同。通过免疫共沉淀进一步分析发现,Pti4、Pti5和Pti6蛋白与病原菌效应蛋白AvrPtoB有相互作用。AvrPtoB与Pti蛋白的互作是否使其成为病原菌毒性效应蛋白的靶标,还是促进Pto蛋白对AvrPtoB的识别,仍需进一步实验探讨。此外,通过农杆菌介导遗传转化,获得了Pti4、Pti5基因过量表达转基因番茄植株。利用真空渗透法接种病原菌Pst DC3000后,与野生型相比,转基因植株叶片、茎秆病斑,叶片菌落计数均明显减少,表明Pti4和Pti5基因可提高番茄对P.syringae pv.tomato的抗性。本工作为进一步探讨与Pto互作的这些Pti转录因子的功能、深入了解它们在病原微生物-植物相互作用关系中的角色,以及应用于植物抗病遗传改良都提供了良好基础。