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杨树黑斑病是由杨盘二孢菌引起的,是杨属树种主要的病害之一。为了从整理上进一步了解杨树抗黑斑病过程中相关基因的表达情况,从病原菌接种72h后的杨树叶片构建的2个cDNA文库中挑选2.952个克隆制定杨树cDNA芯片(片内重复三次),分别取接种4h、24h、48h、72h和7d后的叶片RNA为材料,以接种前的叶片RNA为共同对照,采用反转第一链双色荧光标记法标记样本并进行芯片杂交,研究不同接种时间的基因表达谱。结果表明:在接种的最初阶段(4h)有525个基因被诱导,其中235个被诱导上调,在随后的几天内,被诱导的基因不断增加,72h最多,共801个,7d被诱导的基因最少,77个(被诱导克隆34个)。在整个过程中,共有1,368个克隆(1,160个基因)被不同程度地诱导。从诱导强度上看,在接种24h和72h诱导强度明显增强,接种7天后,大多数基因都恢复到正常表达水平。被诱导基因的数目和表达丰度的变化间接反映了植物对病原胁迫的应答反应过程。根据拟南芥功能分类标准及杨树基因组信息,对1,160个受杨盘二孢菌诱导的基因进行功能分析和染色体定位。分析表明,该1,160个差异表达基因分别属于11个功能类别,除了功能未知基因外,参与新陈代谢,防御反应,信号传导及转录调控的基因最多,这四大类基因约占基因总数的42%。同时,1,160个差异表达基因中有926个基因被定位于19条染色体上,其中被定位于第Ⅱ条染色体上的差异基因最多,共102个(11.0%),其次是第Ⅰ条染色体,共93个(10%),被定位到第ⅩⅦ条染色体上的差异基因最少,仅有11个,基因在染色体上的分布则表现为在部分染色体的末端区域存在大量的聚集,在中间区段则相对较少和排列稀疏,基因的这种分布情况与植物抗病的关系有待进一步研究。WRKY转录因子是植物中最近发现的一类转录因子,研究发现该家族转录因子参与了植物防御反应的应答和多个信号途径。本研究芯片分析显示有四个WRKY转录因子被杨盘二孢菌诱导上调。使用RT-PCR对其中的两个进行进一步的表达分析发现,在病原菌处理后,两个WRKY转录因子在杨盘二孢菌抗病无性系和感病无性系中,在被诱导的时间和强度上均存在明显的差异,同时它们的表达受信号分子SA诱导,但MeJA处理后表达明显受抑制。从而推测这两个WRKY转录因子可能参与了抗杨盘二孢菌的应答反应及信号传导。