论文部分内容阅读
目的:探索建立稳定可靠的外科型急性肝损伤动物模型。方法:50只雄性SD大鼠体重220-340克,平均280+36g,随机将其分为实验组40只和对照组10只。对照组10只进行简单的乙醚吸入麻醉后十字切口开腹关腹,不做特殊处理。实验组分为实验一组20只和实验二组20只,实验一组乙醚吸入麻醉后十字切口开腹,显露胆总管并用1号丝线结扎,同时切除肝脏左叶;实验二组乙醚吸入麻醉后十字切口开腹,显露胆总管并用1号丝线结扎,再显露肝固有动脉并用1-0丝线结扎,同时切除肝脏左叶。术后观察包括精神状态、进食情况、15天生存率;术后3,10,15天动物体重变化与及时抽血检查肝功能(ALT,ALB,T-BIL),15天切取肝脏行病理学检查。统计学采用SPSS软件t检验及多元方差分析。结果:术后3-5分钟SD大鼠能翻身活动,2-4h后自主饮水,逐渐恢复饮食。实验一组术后15天检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)149±40U/L,血清白蛋白(ALB)23±2g/L,血清总胆红素(T-BIL)326+67μmol/L,体重259±35g,15天处死大鼠切取肝脏行病理学检查,发现肝细胞有不同程度损伤,手术时间为5-20分钟。实验二组术后15天检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)161±26U/L,血清白蛋白(ALB)21±2g/L,血清总胆红素(T-BIL)326±53μmol/L,体重265±36g,15天处死大鼠切取肝脏行病理学检查,发现肝细胞有不同程度损伤,手术时间为5-20分钟;10只对照组术后15天检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)40±5U/L,血清白蛋白(ALB)34±2g/L,血清总胆红素(T-BIL)19±4μmol/L,体重287±41g,15天处死大鼠切取肝脏行病理学检查,发现肝细胞正常。术后15天50只大鼠全部存活。通过比较,体重及肝功能实验组与对照组有统计学意义(P<0.05),实验一组与实验二组无统计学意义(P>0.05)。结论:切除肝左叶、结扎胆总管及结扎肝固有动脉是制作急性肝损伤动物的一种很好造模方式。目的:探索辅助性部分原位肝脏移植对大鼠急性肝损伤的改善情况。方法:60只雄性SD大鼠体重220-340克,平均256±28g。随机分30只供体,30只受体。供体手术:供体30只均持续乙醚吸入麻醉,开腹同上,自肠系膜静脉注入含肝素150U的生理盐水2mL,使大鼠全身肝素化。肝门区游离胆总管,剪开胆总管前壁,置入硬膜外导管,长约4mm,1号丝线结扎固定。胆总管远端切断。切断肝周韧带,显露血管并结扎切断,游离肝下下腔静脉。阻断腹主动脉远端,近端置入套管针,剪开膈肌,阻断胸主动脉,剪开胸内下腔静脉及肾下下腔静脉。以4℃肝素平衡盐液注入腹主动脉,同时,用4℃的生理盐水淋洗肝脏,直到肝脏完整切下。结扎、切断肝动脉。在左肾静脉汇入下腔静脉上方,切断肝下下腔静脉。分离、结扎、切断门静脉,环状切断膈肌及胸内下腔静脉,取出供肝。供肝的修整及套管:供肝的修整在4℃的平衡液冰浴中进行。修剪多余的膈肌,肝上下腔静脉两侧用8-0带针线各缝一针。保护好左肝静脉全程及其汇入的下腔静脉。贴近肝静脉汇入口处剪除多余的下腔静脉管道。切除右侧肝脏,只剩左肝,仔细结扎肝断面的管道以防出血和胆漏。保留门静脉与胆总管。门静脉内插入硬膜外导管,门静脉套管直径约2mm,套管上有划痕,以防滑脱,肝下下腔静脉予以结扎。受体手术:开腹同上,充分暴露肝脏,切断镰状韧带、左三角韧带;应用实验二组的急性肝损伤模型,结扎胆总管及肝固有动脉,切除肝左叶时左肝静脉汇入下腔静脉处用静脉血管夹夹闭,在肝内切断左肝静脉,血管断面两侧用8-0带针线各缝一针牵引,远端结扎;显露门静脉左支,切断,远端结扎,近端血管夹夹闭,切断肝动脉及左肝管,移出受体左肝。供肝在左肝叶位置置入。将供肝肝上下腔静脉两侧缝线与受体左肝静脉对应部位缝合结扎作牵引,用8-0血管缝线顺序缝合静脉后壁、前壁;供体门静脉套管套入受体门静脉左支,恢复供体肝左血供;将供体的胆管已经套置的管道放入空肠,荷包缝合,关腹,术后保温,逐渐恢复饮食。术后观察包括精神状态、进食情况、15天生存率;术后3,10,15天动物体重变化与及时抽血检查肝功能(ALT,ALB,T-BIL),15天切取肝脏行病理学检查。统计学采用SPSS软件t检验及多元方差分析。结果:术后3-5分钟受体大鼠能翻身活动,2-4h后自主饮水,逐渐恢复饮食。供体手术时间为40-70分钟,受体手术时间为35-80分钟。30例肝移植大鼠,术中出现死亡3例,其中1例死于麻醉意外,2例左肝静脉撕裂出血所致。15天死亡7例,15天存活率74%(20/27),近期死亡原因为出血2例、空气栓塞1例,远期死亡原因为腹腔感染2例,左门静脉血栓1例,胆漏1例。术后15天检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)119±29U/L,血清白蛋白(ALB)24±3g/L,血清总胆红素(T-BIL)217±35/μmol/L,体重266±31g,15天处死大鼠切取肝脏行病理学检查,发现肝细胞有不同程度再生。实验二组与受体组肝功能统计学方差分析P<0.05,差异有统计学意义。结论:切除肝左叶、结扎胆总管及肝固有动脉制作急性肝损伤动物的一种很好造模方式。随后进行辅助性部分原位肝脏移植(Auxiliary partial orthotopic livertransplantation,APOLT),效果确切,较好模拟了临床APOLT治疗急性肝功能衰竭,发现肝细胞供体有不同程度再生,可以明显改善受体肝功能,渡过危险期,同时丰富该领域的理论和实践。