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目的白细胞介素(IL)-37是IL-1家族的新成员，共有五种不同亚型(IL-37a-e)，目前研究表明只有IL-37b具有生物学功能并在多种疾病中具有抗炎作用。IL-37既可以分泌到细胞外作为细胞因子与受体结合调节细胞活性，也可以进入细胞核作为转录调节因子。IL-37与IL-18具有较高的同源性，可以结合IL-18结合蛋白(IL-18BP)对IL-18信号通路有一定的抑制作用。最新研究发现，类风湿关节炎的滑膜组织中IL-37表达升高。类风湿关节炎是一种人体自身免疫性疾病，其特征表现为慢性滑膜炎症，随着疾病的进展，可能会损坏关节软骨和骨质，最终导致关节畸形和残疾。因此，类风湿关节炎给病人带来了极大的痛苦，生活质量受到严重的影响。类风湿关节炎的发病与多种炎症因子有必然的联系，因为IL-37具有一定的抗炎作用，所以本研究拟构建IL-37真核、原核表达载体并表达纯化IL-37蛋白，以及构建IL-37慢病毒表达载体，利用纯化所得蛋白和包装的慢病毒，研究IL-37对胶原诱导关节炎模型（CIA）的影响。方法1.从人的皮肤组织中提取总RNA，IL-37全长编码序列通过RT-PCR扩增，构建IL-37真核表达载体：pcDNA-3.1(+)-IL-37。2.以pcDNA-3.1(+)-IL-37为模板扩增IL-37成熟肽编码序列，构建IL-37原核表达载体：pET-44-IL-37。3. IPTG诱导表达IL-37蛋白质，利用蛋白C末端的组氨酸标签（His tag）纯化IL-37蛋白质，并去除内毒素。4.以pcDNA-3.1(+)-IL-37为模板扩增IL-37全长编码序列，构建IL-37慢病毒表达载体：pLVX-IL-37-IRES-Green1。包装并收集慢病毒，检测慢病毒滴度及IL-37的表达。5.构建小鼠CIA模型，利用纯化的IL-37蛋白和收集到的慢病毒研究IL-37对小鼠关节炎的影响。结果1.提取人皮肤总RNA，通过RT-PCR扩增出IL-37基因序列，IL-37的序列全长为657bp，成功构建了IL-37真核表达载体和原核表达载体。2.成功表达出IL-37蛋白，经过亲和层析纯化并去除内毒素，获得了高纯的IL-37蛋白；通过细胞实验，发现重组IL-37蛋白具有抑制细胞释放炎症细胞因子的作用，证明纯化的IL-37蛋白质具有生物学活性。3.成功构建出IL-37慢病毒表达载体，并包装获得了高滴度的病毒上清，所包装病毒上清具有感染力，在真核细胞中可以表达IL-37。4.成功复制了胶原诱导的关节炎模型，通过腹腔注射重组IL-37蛋白以及尾静脉注射病毒上清，发现IL-37具有减轻小鼠关节炎症的作用。结论成功构建了IL-37真核、原核表达载体和慢病毒载体；并且通过亲和层析纯化出IL-37蛋白质。通过细胞实验证明获得的重组IL-37蛋白具有较好的生物学活性，IL-37慢病毒上清能够感染真核细胞并且表达IL-37mRNA。利用重组IL-37蛋白质和慢病毒介导表达的IL-37，研究IL-37在对胶原诱导关节炎的影响，发现它能够抑制小鼠关节炎的发生发展。