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Betatrophin是一种新陈代谢调节因子，又被称为肝癌基因相关蛋白TD26、肝及脂肪细胞再喂诱导因子RIFL、蛋白酶抑制因子Lipasin、以及血管紧张素样蛋白ANGPTL8等。Betatrophin是一种分泌型蛋白，由198个氨基酸组成，主要存在于肝脏和脂肪细胞中，在哺乳动物中具有较高的保守性。 研究表明，betatrophin不仅与肝癌细胞的发生和进展有关，还能够通过调节血浆中甘油三酯水平间接参与体内脂肪代谢，并且在糖类代谢中也发挥着重要的作用。也有人认为，betatrophin对胰岛β细胞的增殖具有一定的促进作用。因此，研究 betatrophin在体内的蛋白作用通路及调控关系，对于更准确的了解代谢规律，预防和治疗心血管、糖尿病等都有重要的意义。 本研究中，首先，我们通过构建原核pET-25b-betatrophin表达载体，利用大肠杆菌表达系统、IPTG诱导成功表达betatrophin目的蛋白，并利用高浓度尿素溶解包涵体后纯化及包涵体复性的方法，成功获得高纯度的betatrophin蛋白。 其次，构建 pCold-TF-betatrophin表达载体，利用载体含有 cspA冷冻休克基因启动子以及TF分子伴侣的特点，15℃低温诱导蛋白表达，成功获得以可溶形式表达的融合蛋白，并利用Hispull down方法以及蛋白质谱技术，初步分析可能与betatrophin相互作用蛋白。 第三，为探索 microRNA与 betatrophin的调控关系，采用生物信息学手段预测能够调控 betatrophin表达的 microRNA，并通过构建pEGFP-C1-betatrophin-UTR荧光载体及细胞转染microRNA模拟物的方法对预测结果验证。 通过本研究，成功构建了pET-25b-betatrophin重组载体，并运用包涵体复性获得betatrophin目的蛋白。采用pull down和蛋白质谱技术，初步筛选出十几个可能和 betatrophin相互作用的蛋白。此外，预测并通过构建荧光表达载体以及microRNA模拟物转染细胞最终验证 hsa-miR-4455、hsa-miR-6728-3p、hsa-miR-6747-5p这3种microRNA对betatrophin蛋白表达具有一定程度调控作用。