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也门铁(Dracaenafragrans (Linn) Ker-Gaw)又名香龙血树、巴西铁、千年木等,原产于几内亚,近年来已发展成为我国主要的盆栽观叶植物,而珠江三角洲是我国也门铁幼苗和盆栽集中生产地。目前市场上以普通也门铁、金心也门铁、扭纹铁和金心扭纹铁四个品种最为流行,其中金心也门铁和金心扭纹铁为嵌合体类型。我国也门铁育苗基本都是以离体培养的方式,而在离体繁殖过程中,外植体褐化及两嵌合体品种变异等问题比较严重,极大地阻碍了该植物在我国的应用和发展。本研究对几个也门铁品种的组培条件进行探讨和改进,解决组培中出现的问题,并在嵌合体稳定性机理方面进行初步研究。结果如下:
1.也门铁组织培养过程中由于酚类释放而导致的褐化现象严重。通过研究发现,以频繁转接方法进行组织培养效果较好但工作量大;以接种前外植体在1 g/L Na2S203溶液中浸泡lh,同时在培养基中添加Vc、L一赖氨酸、活性炭粉等防褐剂的方法进行组织培养,抑制效果明显并且方法简单,较适宜于生产应用。
2.以茎段为外植体,筛选出也门铁腋芽启动的最适宜培养基,其中普通也门铁、金心也门铁、扭纹铁为:MS+3.0mg/L6-BA+0.2mg/LNAA+0.2mg/L KT:金心扭纹铁为:MS+3.0mg/L 6-BA+0.3mg/L NAA+0.3mg/L KT,腋芽启动生长的同时也启动腋芽基部周围茎段组织的不定芽分化;再用MS+3.0mg/L 6-BA+0.3mg/L NAA+0.3mg/LGA3做为各个品种也门铁的通用丛生芽的增殖培养基。在增殖培养基中添加1.0 mg/L的AgN03和300mg/L的肌醇可减少变异率,提高有效增殖率。
3.对金心也门铁及金心扭纹铁的盆栽苗和不同处理组培苗项芽的内源激素含量进行测定,结果发现,添加2,4-D使得组培苗中IAA含量的升高和ABA明显的下降,促进愈伤组织的产生;添加AgN03能使组培苗中GA3含量增加,IAA和ZT减少,可使组培苗变异减少,从而推断内源激素GA3,IAA的含量是也门铁变异的重要影响因素。GA3/IAA比值相对较高时,对也门铁的稳定性较好。
4.通过对也门铁叶片的解剖结构观察发现,在稳定结构中绿色叶肉细胞与黄色叶肉细胞的分界明显,形成整齐的毗邻结构:而在不稳定结构中,黄、绿叶肉细胞排列不规则,而且有中间过渡型细胞。金心也门铁黄色部分与绿色部分相比,各色素含量都以相同程度急剧下降,与其他品种的也门铁的色素测定值相比都达到了显著性差异。通过对叶片结构解剖及色素含量测定得出,金心也门铁在叶片结构中产生的不含叶绿体的黄色叶肉细胞,属于一种叶肉细胞的变异类型,其结构可能是对逆境条件产生抗逆性或适应性的结构特征。
5.对也门铁组培生产的壮苗、生根培养与移栽建议,在MS+O.05mg/L6-BA+0.05mg/L NAA+ 1%AC培养基中进行壮苗,效果较好。生根培养采用1/2MS+0.5mg/LIBA培养基,炼苗5-6天后移栽到花卉有机土:泥土为1:1上得到较好的幼苗。