柑橘中黄酮类物质和维生素C的测定方法研究

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柑橘中含有丰富的对人体健康具有促进作用及对一些疾病有防治作用的生理活性成分,如橙皮苷、柚皮苷、橙皮素、新橙皮苷、川陈皮素和橘皮素等黄酮类物质,还富含维生素C,它们具有较高的药用价值、经济价值。本论文的工作围绕柑橘中黄酮类物质、总黄酮和维生素C的测定方法展开,主要研究内容可分为三个部分。第一部分,建立甲醇和乙腈分别作为流动相分离橙皮苷和柚皮苷的反相高效液相色谱法,探讨了流动相组成对分离效果和检测灵敏度的影响。分别以甲醇和一系列不同浓度(0.5%、1%、6%)的乙醇水溶液(28:72)以及乙腈-5%四氢呋喃为流动相,并对两种流动相测定的结果进行比较;用RP-HPLC法研究橙皮中的橙皮苷和橙皮素的含量测定,以蒸馏水和乙腈作为流动相,梯度洗脱(蒸馏水-乙腈的体积比由78:22在4min之内线性变化到70:30),流速为1.00mL/min,检测波长为283nm;新橙皮苷用正交设计实验,以甲醇超声提取。以流动相为甲醇(36%)-水(64%),检测波长为283 nm;川陈皮素和橘皮素通过单因素和正交试验,以甲醇超声提取,在波长218nm下检测。第二部分,以芦丁为对照品,271nm为检测波长,采用紫外分光光度法测定柑橘皮中总黄酮的含量。利用均匀设计法,以功率、时间、乙醇浓度、料液比等为考察因素,研究并比较超声波和微波提取柑橘皮中总黄酮的条件,发现在所用的实验条件下微波法的总提取率高于超声波法。微波法的较优提取条件为:功率390W,时间7min,乙醇浓度50%,料液比1:45g/mL。第三部分,基于抗坏血酸将Cu2+还原成Cu+而与SCN-生成CuSCN沉淀,并经分离以原子吸收分光光度法按照仪器默认工作条件测定沉淀中或离心液中的铜含量而间接测得维生素C含量。这种方法可以不受待测样品颜色的干扰。
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