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目的:腺苷A2A受体基因敲除小鼠与野生形小鼠相比有明显的相对近视,且其相对近视在五周龄后会逐渐恢复并最终消失,本研究的目的是研究多巴胺D2受体在腺苷A2A受体基因敲除小鼠近视恢复中的作用。
方法:首先运用免疫荧光的方法检测小鼠视网膜上多巴胺D2受体的表达情况;其次运用HPLC-MS的方法检测五周龄大的野生型小鼠腹腔注射D2受体拮抗剂Sulpiride后,药物能否到达小鼠的视网膜;其后采用SPF级饲养的五周龄大的A2A受体基因敲除小鼠及普通饲养的野生型小鼠作为实验动物,每种鼠随机分成两组,分别腹腔注射D2受体拮抗剂Sulpiride及Sulpiride的溶剂DMSO;给药两周后,测量小鼠的眼球参数,包括:角膜曲率、瞳孔直径、EIR(屈光力)及OCT(眼球各层厚度),用以检测药物是否引起小鼠眼球参数的改变;给药三周后,测量小鼠视网膜的ERG(电生理),用以检测药物是否引起小鼠视网膜功能的改变;给药四周后,再次测量小鼠的眼球参数,测完后取材,即取整个眼球固定做冰动切片,用以做免疫荧光检测药物是否引起视网膜上D2受体表达量的改变。
结果:1、免疫荧光结果显示WT小鼠视网膜上有多巴胺D2受体的表达;
2、HPLC-MS结果显示Sulpiride能够到达小鼠的视网膜;
3、给药两周后结果显示,A2A小鼠Sulpiride组与DMSO组相比有明显的相对近视及眼轴延长;WT小鼠Sulpiride组与DMSO组相比其屈光力无明显差异,但其玻璃体腔有明显延长。
4、给药三周后结果显示,A2A小鼠Sulpiride组与DMSO组相比有明显的视网膜功能的改变;WT小鼠Sulpiride组与DMSO组相比也有明显的视网膜功能的改变。
5、给药四周后结果显示,A2A小鼠及WT小鼠其Sulpiride组与DMSO组相比均无屈光力差异;但WT小鼠Sulpiride组与DMSO组相比有明显的前房缩短和玻璃体腔延长。
结论:D2受体拮抗剂Sulpiride能够延缓七周龄A2A小鼠近视的恢复,但对WT小鼠只引起近视性特征;Sulpiride没有引起九周龄的A2A小鼠及WT小鼠发生屈光力的改变,但可使WT小鼠产生前房缩短和玻璃体腔延长。
方法:首先运用免疫荧光的方法检测小鼠视网膜上多巴胺D2受体的表达情况;其次运用HPLC-MS的方法检测五周龄大的野生型小鼠腹腔注射D2受体拮抗剂Sulpiride后,药物能否到达小鼠的视网膜;其后采用SPF级饲养的五周龄大的A2A受体基因敲除小鼠及普通饲养的野生型小鼠作为实验动物,每种鼠随机分成两组,分别腹腔注射D2受体拮抗剂Sulpiride及Sulpiride的溶剂DMSO;给药两周后,测量小鼠的眼球参数,包括:角膜曲率、瞳孔直径、EIR(屈光力)及OCT(眼球各层厚度),用以检测药物是否引起小鼠眼球参数的改变;给药三周后,测量小鼠视网膜的ERG(电生理),用以检测药物是否引起小鼠视网膜功能的改变;给药四周后,再次测量小鼠的眼球参数,测完后取材,即取整个眼球固定做冰动切片,用以做免疫荧光检测药物是否引起视网膜上D2受体表达量的改变。
结果:1、免疫荧光结果显示WT小鼠视网膜上有多巴胺D2受体的表达;
2、HPLC-MS结果显示Sulpiride能够到达小鼠的视网膜;
3、给药两周后结果显示,A2A小鼠Sulpiride组与DMSO组相比有明显的相对近视及眼轴延长;WT小鼠Sulpiride组与DMSO组相比其屈光力无明显差异,但其玻璃体腔有明显延长。
4、给药三周后结果显示,A2A小鼠Sulpiride组与DMSO组相比有明显的视网膜功能的改变;WT小鼠Sulpiride组与DMSO组相比也有明显的视网膜功能的改变。
5、给药四周后结果显示,A2A小鼠及WT小鼠其Sulpiride组与DMSO组相比均无屈光力差异;但WT小鼠Sulpiride组与DMSO组相比有明显的前房缩短和玻璃体腔延长。
结论:D2受体拮抗剂Sulpiride能够延缓七周龄A2A小鼠近视的恢复,但对WT小鼠只引起近视性特征;Sulpiride没有引起九周龄的A2A小鼠及WT小鼠发生屈光力的改变,但可使WT小鼠产生前房缩短和玻璃体腔延长。