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哺乳动物的精子发生过程包括:精原细胞经有丝分裂增殖分化为初级精母细胞,后者进而经过两次减数分裂,分化为次级精母细胞直至精子细胞;精子细胞变态,再由圆形精子细胞发育为形似蝌蚪状的成熟精子。而在上述过程中生精细胞主动退化的重要机制就是细胞凋亡。这些过程受到多种因素的调节,但目前对其中涉及的分子机理尚未完全阐明。 丝裂原活化蛋白激酶(Mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号转导通路在生精细胞增殖分化中的作用正日益受到人们的关注。作为细胞内重要的信号传递者,MAPK在细胞发育、分裂、凋亡以及细胞间功能同步过程中都发挥了关键性的作用。在哺乳动物细胞中已证实至少有四个MAPK亚族,即ERK、JNK/SAPK、ERK5/BMK1和p38 MAPK。细胞内每条MAPK信号转导通路都具有相对独立的功能,但各通路之间也存在着相互作用。其中,p38MAPK亚族在应激、炎症、细胞增殖分化以及凋亡中具有调节作用,因此已成为该领域近年来的一个研究热点。但目前对于p38 MAPK在小鼠睾丸发育过程中的表达及其变化尚未——见研究。 为探讨p38 MAPK在小鼠睾丸不同发育阶段以及实验性隐宰中的表达,我们进行了以下研究: 应用蛋白质免疫印迹杂交技术和免疫组织化学SABC法检测1至7周龄小鼠睾丸p38 MAPK的表达及发育变化,并通过图像分析技术对免疫组织化学结果进行统计学分析。 建立小鼠单侧隐睾模型,并以未手术侧拳丸作为对照。应用免疫组织化学 SABC法检测隐睾术后 5、10、15、20天各组标本中p38MAPK的表达变化,并通过图象分析技术对免疫组织化学结果进行统计学分析。 通过以上研究,我们得出了以下结果 门)通过免疫印迹杂交发现,p38 MAPK在 2~7周龄小鼠睾丸中均有表达。免疫组织化学结果显示,在2周龄小鼠睾丸生精小管上皮中即可观察到 p3 8 MAPK免疫反应阳性表达,免疫反应阳性细胞为精原细胞;3、4、5 周龄小鼠睾丸仅有个别生精小管上皮可见p38 MAPK兔疫阳性反应;6、7周龄小鼠摹丸中p38MAPK表达较丰富,免疫反应阳性细胞为精原细胞和初级精母细胞,兔疫反应阳性物质均主要位于细胞核内。在7周龄小鼠睾丸中还可见到部分间质细胞的细胞质亦呈 p3 8 MAPK阳性。 ()隐睾术后 5天,隐睾侧 p3 SMAPK的表达与对照侧相比无显著差别;自术后10天起,隐睾侧生精小管的形态出现不同程度的破坏,p38MAPK的表达也较对照侧显著下降。图象分析的统计结果显示,p3 SMAPK的表达随术后时间的推移逐渐减少。 这些结果提示,p3 8 MAPK可能在促进和维持摹丸组织的发育成熟以及精子发生过程中具有重要的作用。P38 MAPK是一种 2一重要的信号转导系统,可将细胞外的刺激信号转导入细胞内,促使调控细胞增殖、分化等过程的特定基因表达,从而使相应细胞发生增殖、分化,因此它在细胞分裂、增殖过程中具有重要的调控作用。p3 8 MAPK在小鼠睾丸不同发育阶段及实验性隐睾中的表达定位以及变化提示,该MAPK亚族可能对哺乳动物生精细胞的增殖分化具有调控作用,并可能参与了生精细胞凋亡过程的调节。这为进一步从分子水平探讨 p3 8 MAPK对精于发生和睾丸功能的调节机制奠定了基础,对于全面认识 p3 8 MAPK信号转导通路对生殖调控的作用机理也具有重要的意义。