论文部分内容阅读
目的1.观察丹黄明目汤对DR激光术后模型BN大鼠SOD、MDA的影响。2.探讨丹黄明目汤对DR激光术后模型BN大鼠氧化应激的干预效果。3.观察丹黄明目汤对DR激光术后模型BN大鼠视网膜occludin、ZO-l蛋白表达的影响,以及探讨丹黄明目汤对血-视网膜屏障的影响。方法BN大鼠据随机原则分为4组,A组为空白组6只,普通饲料喂养。B组、C组、D组分别为模型组、中药组、安多明组,每组8只,均高脂饲料喂养,采用40mg·Kg-1STZ腹腔注射诱导BN大鼠DR模型。当BN大鼠血糖稳定达到16.7mmol/L,确认建立DM模型。开始计算病程。8周后B、C、D各组随机抽取2只行HE染色,确认成功建立DR模型。应用532氩激光对余18只BN大鼠视网膜行视网膜激光光凝治疗,成模后观察1w,再行FFA检查,可见明显激光斑形成,为糖尿病视网膜病变激光术后模型造模成功。血糖未达标的大鼠视为造模失败,1周后重新造模。A、B组予生理盐水灌胃,C组予中药复方颗粒剂16ml/kg(相当于成人等效剂量)灌胃,D组予安多明混悬液16ml/kg(相当于成人等效剂量)灌胃。均为每日一次,连续灌胃4周。灌胃4周后(病程13周)行FFA,测量BN大鼠的血糖、体重,腹主动脉采血测血清SOD、MDA指标,取双眼球分别行HE染色、Western blot检测occludin、ZO-1蛋白的表达。结果1.血糖、体重:各组造模前血糖水平无明显差异(P>0.0 5),造模后,A组大鼠血糖与B、C、D组血糖在病程3天、9周1 3周在相应时间点有显著统计学差异(P<0.01)。各组在造模前体重无明显差异(P>0.05),在病程9、13周时A组大鼠的体重较相应B、C、D组统计学有差异(P<0.05、P<0.01)。2.血清SOD指标:C组较B组明显升高,与A组接近,组间的差异无统计学意义(=1.153,P>0.05),两两比较,显示A组同B组、C组、D组间无统计学差异(P>0.05)。3.血清MDA指标:B组血清MDA水平较A组升高,各组间差异有统计学意义(=9.232,P<0.05);两两比较,显示A组同C组、B组同D组间无统计学差异(P>0.05),而C组同B组差异有统计学意义(P<0.05)。4.Western blot检测:occludin蛋白相对表达量,A、D组与B组比较,差异不具有统计学意义(P>0.05);C组与B组比较,差异有统计学意义(P<0.01);ZO-1蛋白相对表达量,D组与B组比较,不具有统计学意义(P>0.05),A、C组与B组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论1.BN大鼠DR激光术后模型血糖值持续偏高,体重持续下降。2.丹黄明目汤对大鼠的血糖及体重无明显改善。3.丹黄明目汤可以抑制大鼠视网膜氧化应激水平。本研究中MDA的含量下降,而SOD含量升高,提示丹黄明目汤可以改善大鼠视网膜的氧化应激状态,能有效清除自由基,保护视网膜细胞免受氧化损伤。4.丹黄明目汤及安多明均可提高DR大鼠视网膜occludin、ZO-1蛋白的表达,其中丹黄明目汤效果更佳。提示丹黄明目汤可能是通过升高occludin、Z O-1的相对表达量,从而影响T J的粘接性能,来修复B R B的损伤。5.本实验通过氧化应激及视网膜组织蛋白表达的测定评估了丹黄明目汤在治疗糖尿病性视网膜病变激光术后中的作用,提示丹黄明目汤可以通过抑制大鼠视网膜的氧化应激状态,增强血管抵抗力,改善血管通透性,修复BRB的损伤,改善视网膜功能。