顶花板凳果甾体生物碱的提取和次生代谢物的检测

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顶花板凳果植物(Pachysandra terminalis Sieb. Zucc)隶属黄杨科(Buxaceae)板凳果属,是一种常用的民间中草药,有祛风除湿和舒筋活络之效。不仅常用于治疗风湿性关节痛、肢体麻木、跌打损伤,而且最新研究表明其富含的甾体生物碱还具有良好的抗肿瘤活性。板凳果属共有3种2变种,广泛分布于陕西、湖北、贵州、甘肃、四川及日本和美国东南部等地,资源丰富。因此对其甾体生物碱的提取、定量分析和其次生代谢物质的系统分析之研究,可为该中药材的临床药用打下一定的基础,对今后更好的开发利用板凳果属植物资源无疑具有重大的价值。本研究建立了顶花板凳果甾体生物碱的快速分离方法,且对其进行了定量分析,并比较了该植物中主要次级代谢产物的含量及分布情况。在此基础上,也以“长富2号”、“玉华早富”苹果树为试材,研究了苹果树修剪后剪口次生代谢物含量的变化。得到的主要结论如下:1.用石油醚、丙酮和二乙胺溶剂可快速分离得到该中草药的主要活性成分——甾体生物碱。顶花板凳果样品经乙醇提取后,用正丁醇萃取浸膏得到总生物碱,将其干法上样硅胶柱后用石油醚、丙酮及二乙胺(20:5:1和60:5:1)混合溶剂进行梯度洗脱,最后精制得到单一组分甾体生物碱;2.采用紫外—可见光分光光度法测定该中草药的生物碱在内的次生代谢物含量分布情况。生物碱在地下茎的含量最高,可达到22.921mg/g DW,几乎为其他部位含量的两倍。在根中含量最少(11.255mg/g DW),全草平均含量也只有12.444mg/g DW,因此其主要的药用部位为地下茎;3.该中草药中的糖与生物碱一样,也集中于地下茎部(10.762mg/g DW),几乎是其余部位的两倍;4.顶花板凳果的黄酮类物质却在地下茎部含量最少,而集中在叶部(23.514mg/gDW);5.同理可测苹果枝剪口次生代谢物的含量。苹果秋梢在修剪后其剪口皮层的总酚含量随剪后暴露时间的延长呈“先快速升高—后逐渐下降—再缓慢回升趋于正常”的变化趋势,总酚变化范围为7.749mg/g~12.612mg/g(FW)。
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