目的:胃癌(Gastric Cancer GC)是我国常见的消化系统恶性肿瘤之一,按照2012年全球肿瘤流行病统计数据(GLOBOCAN2012)可知,胃癌是全球第五大常见肿瘤,亦是第三位导致癌症相关死亡的肿瘤。在中国,胃癌居常见恶性肿瘤顺位的第三位,居癌症相关死亡顺位的第二位。我国每年胃癌新发的病例数约为40万,约占全世界总发病例数的42%。多数胃癌患者在诊断时已为晚期,生存时间较短且整体生活质量差。传统的治疗方法有手术、放疗和化疗,但对于晚期胃癌,手术治愈率低,且放化疗疗效欠佳。近年来,免疫治疗的进步及取得一定的临床疗效使其成为一种新的治疗模式,免疫治疗包括T淋巴细胞过继治疗、肿瘤疫苗、Toll样受体激动剂和免疫检查点抑制剂等。其中,免疫检查点抑制剂发挥了重要的作用,目前对其研究方兴未艾,如程序性死亡因子1(programmed cell death-1 PD-1)及其配体(programmed cell death ligand 1 PD-L1),它是机体免疫系统中的抑制性通路,该检查点通路对于调节生理性免疫应答的持续时间和幅度、维持免疫耐受起着重要的作用,从而避免了免疫应答对正常组织的损伤和破坏。另外,该抑制性检查点是由受体/配体的相互作用所调控,可能参与介导了肿瘤免疫逃逸的过程。前期关于PD-1和PD-L1的研究主要集中在肺癌及黑色素瘤等实体肿瘤上,并已取得了一定的临床疗效,PD-1抑制剂Nivolumab和Pembrolizumab已获美国FDA批准分别用于晚期鳞状非小细胞肺癌和不可切除/转移性黑色素瘤的临床治疗,但在胃癌患者的治疗中尚缺乏有力证据。本研究主要通过免疫组织化学法检测PD-1和PD-L1分子在胃癌中的表达状况,并探讨其与临床病理特征及患者预后的关系。方法:收集河北医科大学第四医院2007年1月至2007年12月期间接受过手术的胃癌患者的肿瘤石蜡组织标本及其对应的临床病例资料,选取术后病理分期(pTNM分期)为III期和IV期的胃癌患者共82例。收集患者的各临床资料包括年龄、性别、肿瘤直径大小、分化程度、肿瘤部位(胃的切除范围)、肿瘤浸润深度、有无脉管瘤栓、有无淋巴结转移及术前有无远处转移等指标。电话随访患者的生存状况,采用免疫组织化学法检测肿瘤组织中蛋白表达状况,根据染色强度分级和阳性细胞密度分级的乘积评定pd-1和pd-l1蛋白的表达情况,对所有数据采用spss21.0统计软件进行分析,对pd-1与pd-l1间表达相关性比较及与其临床病理特征的关系分析采用χ2检验,应用kaplan-meier法进行生存曲线分析,log-rrank检验生存率差异有无统计学意义,对胃癌患者各项临床指标与预后的关系进行单因素和多因素cox回归分析,p<0.05为差异有统计学意义。结果:1胃癌患者中,pd-l1蛋白表达阳性率为42.68%,主要定位在肿瘤细胞和瘤间质浸润淋巴细胞的细胞质和细胞膜上,肿瘤浸润淋巴细胞显微镜下可呈现小圆形,核大浆少,点样分布,其中肿瘤细胞上的阳性表达率为32.93%,癌间质浸润淋巴细胞上阳性表达率为21.95%。pd-1蛋白表达的阳性率为13.41%,且主要定位在肿瘤浸润淋巴细胞(til)的细胞质和细胞膜上。肿瘤组织中pd-1蛋白表达阳性率低于pd-l1表达阳性率,其中43例胃癌组织呈现出既无pd-l1也无pd-1蛋白阳性表达。2胃癌组织中pd-1分子表达阴性患者中瘤细胞pd-l1表达阴性率、阳性率分别为70.42%、29.58%,胃癌组织中pd-1分子表达阳性患者中癌细胞pd-l1表达阴性率、阳性率分别为45.45%、54.55%(p>0.05);胃癌组织中pd-1表达阴性患者中癌间质pd-l1表达阴性率、阳性率分别为77.46%、22.54%,胃癌组织中pd-1表达阳性患者中癌间质pd-l1表达阴性、阳性率分别为81.82%、18.18%(p>0.05)。胃癌组织中pd-1蛋白表达与癌细胞和癌间质浸润淋巴细胞中pd-l1蛋白表达均无显著相关性。3胃癌组织中pd-1表达阳性率在术前无远处转移及术前有远处转移的患者中分别为3.28%、42.86%(p<0.05),癌细胞中pd-l1表达阳性率在术前无远处转移及术前有远处转移的患者中分别为13.11%、90.48%(p<0.05),癌间质中pd-l1表达阳性率在术前无远处转移及术前有远处转移的患者中分别为13.11%、47.62%(p<0.05),胃癌组织中pd-1蛋白表达和pd-l1蛋白的表达与患者术前有无远处转移和肿瘤的浸润深度密切相关,其中癌间质细胞中pd-l1蛋白的表达与肿瘤的分化程度密切相关。然而胃癌组织中PD-L1表达和PD-1表达与病人年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤部位及有无脉管瘤栓均无显著相关性。4对可能影响胃癌患者预后的因素(年龄、性别、肿瘤直径大小、分化程度、手术胃切除部位、有无脉管瘤栓、肿瘤浸润深度、PD-L1蛋白过表达及术前有无远处转移等)进行单因素COX回归分析,结果显示,胃的切除范围(P<0.05)、PD-L1蛋白过表达(P<0.05)及术前有无远处转移(P<0.05)是影响胃癌患者预后的不良因素。同时多因素COX回归分析,结果显示,癌细胞中PD-L1蛋白表达及术前有无远处转移是影响患者生存期的独立因素。根据Kaplan-Meier生存曲线分析,癌细胞中PD-L1蛋白表达与患者术后生存期呈显著相关,PD-L1阳性表达者较阴性者术后生存时间短,Log-Rank检验生存率差异有统计学意义(P<0.05);而癌间质中PD-L1蛋白阳性表达与术后生存期无显著关系。胃癌组织中PD-1表达与患者术后生存时间无显著相关性。结论:1 PD-1和PD-L1分子能够表达在胃癌组织中,其中PD-L1的表达主要定位在癌细胞和癌间质浸润淋巴细胞的细胞质和细胞膜上,PD-1的表达主要定位在TIL的细胞质和细胞膜上。2胃癌组织中PD-1表达和PD-L1蛋白表达与患者术前有无远处转移和肿瘤的浸润深度密切相关。而与病人年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤部位及有无脉管瘤栓均无显著相关。3胃癌患者中,PD-L1阳性表达者较阴性表达者的术后生存时间短,提示PD-L1表达是患者预后的独立影响因素。而PD-1蛋白的表达与患者术后生存期无显著相关。