玉米螟是世界性重大农业害虫之一,危害严重且分布极广。因其繁殖快、世代多以及较强的农药抗性,对其进行化学防治将面临越来越大的困难。因此,寻找高效、安全、环保的农药替代物已成为亟待解决问题。在本研究中,以玉米和亚洲玉米螟Ostrinia furnacalis作为研究对象,在明确茉莉酸甲酯(Methyl jasmonate,MJA)诱导玉米抗性反应影响亚洲玉米螟生长发育基础上通过双向电泳和MS技术鉴定了60个响应MJA处理的差异表达蛋白,并对其进行了功能分析。对4个重要植物防御相关蛋白编码基因构建了原核表达载体并成功诱导了重组蛋白,利用生物测定的方法验证了重组蛋白对亚洲玉米螟生物学活性的影响。其中,pET28a-TRX和pET28a-PRP表达的重组蛋白对亚洲玉米螟幼虫的生长发育产生了显著影响,生长抑制率分别达30.33%和34.14%。pET28a-GRBP表达的融合蛋白亦对蛹重有显著影响,这暗示我们所获得的玉米防御蛋白可能是一种良好的植物抗虫蛋白。谷胱甘肽-S-转移酶是昆虫体内一类重要解毒酶系,它对许多有毒化合物具有代谢消化作用,从而增强昆虫的抗性。采用RT-PCR和RACE技术从亚洲玉米螟中肠中克隆了一个谷胱甘肽-S-转移酶基因,将其命名为OfGST,并进行了生物信息学分析。以此为基础,构建了原核表达载体并进行融合蛋白诱导表达,以纯化的重组蛋白制备了多克隆抗体。Western blot分析显示该解毒酶经丁布诱导后表达量增加,至24h时最大。同时,利用表达载体L4440构建了RNAi重组质粒并将其导入受体菌HT115中,经IPTG诱导获得了表达目的dsRNA的RNAi工程菌。自然饲喂取食法进行干扰效果检测表明,与对照组相比,干扰组亚洲玉米螟幼虫死亡率高达54%,初步证明我们成功构建了亚洲玉米螟谷胱甘肽-S-转移酶基因的RNAi工程菌,这为农业上对亚洲玉米螟进行生物防治提供了一条新途径。