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本文以海洋卡盾藻日本株为实验材料,在室内条件下,研究了该藻在不同生长时期和不同培养条件下的产毒能力。实验结果表明:
1)海洋卡盾藻日本株在实验室培养条件下能产生溶血毒素。该藻合成的溶血毒素至少含有4种组分,其中包括3种糖脂类。实验室培养的海洋卡盾藻日本株在不同生长期和不同环境条件下的溶血活性存在差异,衰亡期的溶血活性最高,达20.53HU/L、14.16×10-7HU/cell。无论是海洋卡盾藻日本株的总体溶血活性还是单个藻细胞的溶血活性都在25℃时最高,分别达21.98HU/L、11.16×10-7HU/cell,30℃时的活性最低,分别为7.48HU/L、8.91×10-7HU/cell。在P限制时,海洋卡盾藻日本株单个藻细胞的溶血活性最强,达到31.47×10-7HU/cell;依次是N限制、Fe3+限制。从细胞总体溶血活性来看,缺N,缺P,缺Fe条件下的总体溶血活性相差不大,但均低于正常条件下的总体溶血活性。海洋卡盾藻日本株在自然海水中的总体溶血活性最高,为21.98HU/L;在盐度为35ppt时最低,为9.22HU/L,盐度在15ppt时总体溶血活性高于25ppt。从单个藻细胞的溶血活性来看,15ppt时最高,为20.31×10-7HU/cell。由此可见,当盐度下降时,单个藻细胞的溶血活性有增加的趋势。
2)海洋卡盾藻日本株具有产生过氧化氢的能力。在整个生长周期中,海洋卡盾藻日本株产生过氧化氢的峰值集中在接种后的第4、6、8天,最高产量约为1.93×10-4nmol/cell/min;不同氮磷比条件下,海洋卡盾藻日本株的总体过氧化氢产量在N:P比为4:1时最高,N:P比为8:1时最少,分别为3.68mmol/L/min和1.38mmol/L/min;而海洋卡盾藻日本株单个藻细胞的过氧化氢产量则在N:P比为32:1时最高,为3.32×10-4nmol/cell/min;在N:P比为16:1时产量最低,约为0.80×10-4nmol/cell/min;当处于高铁条件(5×10-8M)时,海洋卡盾藻日本株的总体过氧化氢产量和单个藻细胞的过氧化氢产量均最高,分别为1.68mmol/L/min和1.81×10-4nmol/cell/min。海洋卡盾藻日本株在最适生长盐度范围内(20-30ppt),其总体过氧化氢产量和单个藻细胞的过氧化氢产量在盐度为30ppt时最高,20ppt时最低。
3)从海洋卡盾藻日本株中检测到8种脂肪酸,其中饱和脂肪酸3种,单不饱和脂肪酸1种,多不饱和脂肪酸为有4种。环境因子对海洋卡盾藻日本株的脂肪酸百分含量影响较大,不同的营养盐对不同的脂肪酸百分含量的影响不尽相同。
4)海洋卡盾藻日本株的藻液和滤液对卤虫均有致死作用,藻液的致死作用强于去藻过滤液,处于衰亡期的海洋卡盾藻日本株的藻液对卤虫的毒性最强。海洋卡盾藻日本株藻液浓度对数与卤虫的死亡机率单位在48h的急性毒理实验中两者呈线性关系,藻液对卤虫的48hLC50为1.21×104cells/ml,而滤液对卤虫的48hLC50为5.31×104cells/ml。
通过本研究,将有助于揭示鱼毒性赤潮生物海洋卡盾藻日本株的生长、产毒与生长环境因子间的关系,阐明鱼毒性赤潮藻海洋卡盾藻日本株对海洋浮游生物的致毒机理,为减轻我国鱼毒性赤潮的危害,制定科学合理的赤潮监测方案提供科学依据。