链霉菌TOR3209及其挥发性化合物对烟草生长发育的调控研究

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植物根际促生菌(PGPR)是一种能够在植物根部定植并促进植物生长的微生物,在调节土壤健康和调控作物生长发育中起到重要作用。链霉菌是PGPR中的重要的一类,能够产生多种次生代谢产物,在调节作物生长发育和维护土壤生态中起到重要作用。本人所在团队前期的研究表明,链霉菌TOR3209能够显著促进植物的生长、诱导植物抗病、抗逆等,同时也初步发现链霉菌TOR3209的挥发性化合物(VOCs)对烟草的生长发育有显著作用,但对于链霉菌TOR3209对植物的调控机制尚不清楚。本研究以链霉菌TOR3209为供试菌株和以烟草为供试植物,探索链霉菌与植物互相作用的生物学机制。主要研究:(1)链霉菌TOR3209的PGPR特性及其菌悬液对烟草生长发育的影响。(2)链霉菌TOR3209的VOCs对烟草生长发育的影响;采用GC-MS鉴定链霉菌TOR3209的VOCs组分,并进行验证。(3)链霉菌TOR3209的VOCs作用下的烟草幼苗的转录组分析。主要试验结果如下:(1)链霉菌TOR3209具有产IAA、铁载体和溶磷的能力,产IAA的能力在8.85-14.89mg/L,产铁载体的可溶性指数为1.25,溶解有机磷的可溶性指数为2.35。链霉菌TOR3209菌液在高浓度(1.0×10~9CFU/m L)下抑制了烟草的生长,在低浓度(1.0×10~3CFU/m L)下能促进烟草生长但不显著。(2)使用分隔平皿研究链霉菌TOR3209产生的VOCs对烟草生长发育的影响,结果表明,处理组的鲜重比对照组增加100%,证明链霉菌TOR3209的VOCs对烟草具有显著促生的能力。(3)采用固相微萃取方法对链霉菌TOR3209的VOCs组分进行鉴定,共发现38种物质。与CK相比,2,4-二叔丁基酚和1-ethyl-1-isopentyloxy-1-silacyclohexane含量最高,分别为31.32%和17.93%。处理组中的十七烷酸、月桂酸、异戊醇和4-叔丁基茴香醚这四种物质的含量与CK相比存在差异。(4)对十七烷酸、月桂酸、异戊醇和4-叔丁基茴香醚四种物质进行功能验证。结果表明,异戊醇在1mol/m L、1mmol/m L、1μmol/m L不同浓度下均能促进烟草的生长,其他三个化合物的促生效果与CK不显著。(5)对链霉菌TOR3209的VOCs处理后的烟草进行了转录组分析。结果表明,链霉菌TOR3209对烟草的基因表达有调控作用,其中过氧化物酶4、ACCSL蛋白、UDP-糖基转移酶和谷氨酸受体上调幅度最大,这些基因在植物生长发育调控中起着重要作用。KEGG通路富集分析中,主要是谷胱甘肽代谢、牛磺酸代谢、植物-病原相互作用、内质网加工蛋白过程、谷氨酸代谢通路,这些通路与植物的生长发育与代谢有着密切关系。转录因子基因表达多集中于bHLH家族、WRKY家族、ERF家族、C2H2家族中,这些转录因子家族在植物发育过程中都有着重要的作用。本研究初步揭示了链霉菌TOR3209调控烟草生长发育的机制,丰富了微生物与植物互作的生物学机制,同时也为开发新型高效的微生物产品奠定基础。
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