火锅底料中罂粟壳主成分免疫侧向层析检测方法研究

来源 :合肥工业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hou0608
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近年来,食品添加剂相关安全事件频繁出现在公众的视野之中,因此,引发了消费者对于食品安全的担忧;同时,消费者的饮食观念也从过去的温饱发展到如今的绿色健康。其中,中国政府和法律已明文禁止使用危害人体健康的添加物,但仍有一些食品生产经营者通过在火锅底料中添加罂粟壳来谋取个人利益。本研究以罂粟壳有效成分吗啡为实验检测对象,区别于传统的色谱法、光谱法以及电泳法,建立了快速检测火锅底料中罂粟壳主成分的免疫侧向层析试纸条方法,以保证人类健康和社会稳定。胶体金免疫侧向层析试纸条吗啡检测方法的建立,是基于抗原抗体特异性识别原理、免疫竞争机制和侧向层析方法对吗啡进行试纸检测,并进行特异性和灵敏度测试。当待测样品中存在目标物时,吗啡优先与金标偶联物结合,导致检测线显色被削弱或消失。火锅底料经过简单的预处理,在最优实验条件下,可在10 min内实现吗啡检测,裸眼检测灵敏度为5 ppb,标准曲线在0.1-5 ppb范围内线性良好。在普通胶体金免疫侧向层析试纸条的基础上,通过两条检测线浓度差异,实现对火锅底料中吗啡半定量检测。在最优实验条件下,10 min便可完成吗啡检测,裸眼检测灵敏度为5 ppb,在1-30 ppb(检测线T1)和0.1-5 ppb(检测线T2)范围内分别呈现不同的良好线性关系。改变传统胶体金免疫侧向层析试纸条中纳米粒子的选取,用荧光微球取代胶体金纳米粒子,使之与吗啡单克隆抗体的结合方式由静电吸附转变为更稳固的化学作用。在最佳实验条件下,10 min便可完成吗啡检测,裸眼检测灵敏度为0.5 ppb,较传统胶体金试纸条提高了10倍,标准曲线线性范围为0.001-0.5 ppb。这些研究结果有力地证明了这些方法具有强特异性和高灵敏度,可以成功地应用于火锅底料中罂粟壳主成分的现场筛选。
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