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近些年来,随着全球蜂蜜消费量的增加,蜂蜜的安全性受到了极大的关注。四环素类抗生素(Tetracylines,TCs)是一类广谱抗生素,在养蜂过程中,通常被用来防治蜜蜂白垩病及腐臭病,而污染蜂蜜。另外TCs具有促进动物生长作用,也被广泛用作饲料添加剂,因而残留在蜂蜜中。TCs在蜂蜜样品中以痕量存在,并且蜂蜜样品基质比较复杂,故建立一种特异性好且灵敏度高的样品前处理方法具有重要意义。本文主要研究内容如下:(1)基质固相分散(MSPD)-高效液相色谱(HPLC)法测定蜂蜜中四环素类抗生素建立了 MSPD-HPLC法测定蜂蜜中土霉素、四环素、金霉素等四环素类抗生素的检测方法,并对MSPD和HPLC条件进行了考察和优化。在MSPD中,以C18为分散剂,蜂蜜:C18=1:4,醋酸/甲醇(5/95,v/v)为洗脱剂,洗脱剂体积为6mL。色谱分析中流动相为乙腈+甲醇+0.01mol/L柠檬酸(20+10+70)在355nm波长,35℃柱温下以0.8 mL/min的流速进行等度洗脱。结果表明:在0.1～20μg/mL线性范围内良好,OTC、TC、CTC的回收率分别在83.27%～92.61%,88.26%～95.32%,87.33%～96.98%之间。(2)分子印迹聚合物的制备以硅胶为载体,土霉素(OTC)为模板分子,甲基丙烯酸(MAA)为功能单体,二甲基丙烯酸乙二醇酯(EDMA)为交联剂,偶氮二异丁腈(AIBN)为引发剂,制备了对TCs具有选择性识别能力的分子印迹聚合物,优化了聚合反应条件。聚合反应中各试剂用量分别为:OTC0.1282g,乙腈140mL,MAA0.130mL,EDMA1.413mL,AIBN5mg,通过扫描电镜和红外光谱分析均证明成功制备了表面印迹聚合物。结合静态吸附、动力学吸附、选择性吸附等实验研究了所制备的表面印迹聚合物的特异吸附性能,结果表明以土霉素为模板合成的MIP对TCs具有特异性吸附。(3)分子印迹固相萃取(MISPE)-高效液相色谱(HPLC)法测定蜂蜜中四环素类抗生素采用MISPE对蜂蜜样品进行前处理,用HPLC测定其中的TCs,确定了MISPE条件:分子印迹聚合物的填料为300mg,甲醇/水(5/95,v/v)作为淋洗液,体积为5mL,甲醇/乙酸乙酯(20/80,v/v)作为洗脱液,体积为6mL。比较了两种前处理方法,结果发现MISPE要优于MSPD,可直接用于富集、分离和检测蜂蜜中的TCs。该方法准确度和精密度良好,为快速、准确地测定蜂蜜中四环素类抗生素含量提供了新的思路。