小花型夏菊品种花器官愈伤辐射诱变研究与再生苗遗传变异的RAPD分析

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首先以‘金莲’、‘白矮生’、‘矮红’3个小花型夏菊品种的舌状花和管状花作为外植体进行组织培养研究;然后利用10、15、20Gy的60Co γ射线对这3个小花型夏菊品种的舌状花和管状花诱导的愈伤组织进行辐射处理;最后利用RAPD技术从分子水平上对‘金莲’辐射再生苗的遗传变异程度进行分析。研究结果表明: 1.基因型及外植体类型影响花器官的愈伤诱导率、分化率以及愈伤平均分化芽的数目。‘金莲’品种的愈伤诱导率、分化率以及愈伤平均分化芽的数目均最好,管状花和舌状花分别为74.25%、30.61%、4.91和61.71%、27.28%、3.82。‘矮红’品种最差,分别为72.50%、19.03%、0.60和58.39%、11.02%、0.27,3个品种的愈伤分化率在5%水平上达到显著性差异,平均分化芽数差异在1%水平上达到显著差异。外植体类型对三个指标也有很大影响,管状花外植体均明显好于舌状花外植体,如‘白矮生’品种管状花的三个指标分别为71.66%、21.10%、2.53;舌状花三个指标分别为57.33%、13.21%、1.68,管状花的指标均显著高于舌状花的指标。 2.60Co γ射线对3个品种不同外植体诱导产生的愈伤组织的褐化、分化能力均有影响。随着辐射剂量的增加,不同来源的愈伤组织褐化程度均加重,分化能力减弱,当辐射剂量达到15Gy时,‘矮红’品种所有愈伤都失去分化能力,‘白矮生’舌状花产生的愈伤失去分化能力。当辐射剂量为20Gy时,只有‘金莲’品种的愈伤仍然具有分化能力,但分化能力与对照相比已很弱,管状花和舌状花产生的愈伤分化率和平均分化芽数目分别为对照的57.11%、28.51%和47.65%、31.68%。此外,基因型和不同来源的愈伤组织,对γ射线敏感性也有差异,‘矮红’品种的愈伤最敏感,舌状花产生的愈伤比管状花产生的愈伤辐射敏感性强。 3.RAPD技术作为一种有效的分子鉴定手段可以有效、快速地检测出辐射再生苗基因组的变异程度。RAPD研究结果表明,再生辐射苗的基因组遗传变异程度与所接受γ射线剂量成正相关性,即愈伤受到辐射剂量越大,则由该愈伤分化的苗变异程度就越大。10、15和20Gy 3个处理的再生苗的遗传变异程度与对照相比,其变异系数分别为0.223、0.335和0.393。通过RAPD技术筛选出了一批变异植株,其田间表现情况正在进一步观察。
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