[目 的]卵巢恶性肿瘤中最为常见的是卵巢上皮癌,由于其隐匿的早期症状,筛查手段的相对缺乏,因此大多数患者确诊时肿瘤已进展成为晚期。据美国国家癌症中心数据显示,近20年来卵巢癌的5年总生存率在30%徘徊。肿瘤细胞减灭术辅以铂类为基础的铂二联化疗,常作为晚期卵巢癌的标准初始治疗方案。虽然前期治疗可使大部分患者获得疾病缓解,但几乎所有的晚期卵巢癌患者都会面临着疾病复发。此外在卵巢癌中因促性腺激素与雌激素存在,可增加ROS的产生,进而上调Nrf2表达,对肿瘤细胞的增殖、凋亡及迁移等生物学行为产生影响。生育酚为常见的非酶类抗氧化剂可有效地纠正肿瘤细胞中氧化还原系统失衡,进而在肿瘤的发生、发展过程中发挥着重要作用。但近年来α-生育酚的相关报道在不同癌种其发挥的作用不尽相同,因此值得探索α-生育酚在卵巢癌中发挥的生物学作用及可能潜在机制。本研究旨在卵巢癌SKVO3细胞系中探索经α-生育酚处理后对SKVO3细胞增殖及迁移的影响;并进一步阐释其发挥作用与pan-PKC、ERK1/2、YAP1、Nrf2、Keap1 蛋白表达的相关性。[方法]1.用 α-生育酚 25mg/L、50mg/L、100mg/L、200mg/L 及 400mg/L 剂量分别处理卵巢癌SKVO3细胞系,设立DMSO处理组为阴性对照组。分别在处理后24h、48h、72h采用CCK-8液测量各组的细胞增殖情况。2.用α-生育酚25mg/L、50mg/L、100mg/L及200mg/L浓度分别处理卵巢癌SKVO3细胞系,设立DMSO处理组为阴性对照组。在Oh时对各组做划痕处理并记录划痕宽度,分别在划痕处理后的24h及48h测取SKVO3细胞在划痕处迁移情况。3.用α-生育酚25mg/L、50mg/L、100mg/L及200mg/L浓度分别处理卵巢癌SKVO3细胞系,设立DMSO处理组为阴性对照组。在Oh时将各组SKVO3细胞分别铺在Transwell小室上,在24h后,经结晶紫染色后分别观察各组小室上SKVO3细胞迁移数目。4.采取Oncomine数据库中的基因信息,明确YAP1、Nrf2在卵巢癌患者组织或血液较正常人卵巢组织或血液中的表达情况。利用大数据分析筛选TCGA数据库中的卵巢癌患者信息,将YAP1、Nrf2筛选出高、低表达两组,利用Kaplan-Meier描绘YAP1、Nrf2表达水平与卵巢癌患者生存预后之间的关系。5.用α-生育酚25mg/L、50mg/L、100mg/L及200mg/L浓度分别处理卵巢癌SKVO3细胞系,设立DMSO处理组为阴性对照组。在处理48h后,采用western blot测量各组中pan-PKC、ERK1/2、YAP1、Nrf2、Keap1蛋白量的表达情况。[结果]1.细胞CCK-8实验显示:与DMSO对照组相比,α-生育酚在浓度剂量为25mg/L、50mg/L、100mg/L、200mg/L 及 400mg/L 时分别处理 SKVO3 细胞,在处理后24h、48h、72h分别观测,α-生育酚可不同程度抑制卵巢癌细胞的增殖(P<0.05)且呈现时间与浓度依赖性。2.细胞划痕实验显示:与DMSO对照组相比,α-生育酚在浓度剂量为25mg/L、50mg/L、100mg/L 及 200mg/L 时分别处理 SKVO3 细胞,在时间 24h 及48h分别检测,各浓度α-生育酚在处理后24h及48h均未发现对SKVO3细胞迁移产生明显影响(P>0.05)。3.细胞Transwell实验显示:与DMSO对照组相比,α-生育酚在浓度为25mg/L、50mg/L、100mg/L及200mg/L分别处理SKVO3细胞在时间点24h后未发现α-生育酚对于SKVO3细胞迁移产生明显影响(P>0.05)。4.YAP1在卵巢癌组织表达较正常卵巢组织表达无明显差异性(P=0.290),Nrf2的表达在正常组织与卵巢癌患者血液中表达差异有统计学意义(P<0.05)。5.Western Blot结果显示:与DMSO对照组相比,α-生育酚在浓度为25mg/L、50mg/L、100mg/L 及 200mg/L 分别处理 SKVO3 细胞 48h 后;SKVO3 细胞中pan-PKC、YAP1、Nrf2、ERK1/2的蛋白表达量随α-生育酚处理浓度下降,差值可见有统计学意义(P<0.05),而蛋白质Keap1的表达量随α-生育酚处理浓度上升,差值具有统计学意义(P<0.05)。[结 论]1.α-生育酚可以抑制卵巢上皮癌SKVO3细胞的增殖,具有时间及浓度依赖性,但对其迁移性无影响。2.α-生育酚可能通过pan-PKC、YAP1、Nrf2、ERK1/2蛋白的表达量下调,Keap1的表达量上调,进而影响卵巢上皮癌SKVO3细胞的增殖。