细胞中蛋白的稳态由众多的蛋白因子来维持,这些因子共同形成一个可协调的稳态网络。分子伴侣是稳态网络成员中重要的一员,并且参与到所有的维持蛋白稳态的活动中。新生蛋白通常需要分子伴侣的协助才可以有效地折叠成有功能的三维结构。分子伴侣能够协助新生肽链的折叠,确保新生肽链不会错误折叠或者聚集。大肠杆菌Trigger Factor(TF)是核糖体结合分子伴侣,是大肠杆菌内新生肽链遇到的第一个分子伴侣。TF的结构中存在有一些特殊的区域,推测与TF功能相关。为了了解这些区域对TF功能的作用,本研究通过定点突变方法将所选择的14个位点对应的氨基酸残基用半胱氨酸残基替换,随后选取碘乙酰胺、碘乙酸、2-溴乙胺和N-苯基马来酰亚胺对半胱氨酸残基进行化学修饰从而改变局部理化性质;进而以溶菌酶和甘油醛-3-磷酸脱氢酶作为底物蛋白,检测TF突变体帮助变性蛋白质重新折叠以及阻止变性蛋白聚集的能力。通过比较化学修饰前后TF分子伴侣活性的差异,分析了这些区域在TF分子伴侣功能中的作用。研究结果发现,所研究的14个区域在TF分子伴侣活性中具有不同的功能作用,其功能作用与该区域的疏水、极性以及电荷状态相关。此外研究还发现,在TF帮助不同底物蛋白进行折叠时,相同区域的同种化学修饰也会产生不同的结果,说明TF对底物折叠的辅助情况也取决于底物本身的特性。这些研究结果将加深人们对TF分子作用机制的认识,为改造大肠杆菌的分子伴侣体系,提高大肠杆菌外源蛋白表达效率提供了理论基础。