循环肿瘤细胞(CTC)及循环肿瘤干细胞(CTSC)的检测与结直肠癌临床资料的相关性分析

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目的:通过检测结直肠肿瘤患者外周血中的循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTC)以及循环肿瘤干细胞(circulating tumor stem cells, CTSC),分析其数目与患者临床分期、肿瘤淋巴结转移、肿瘤远端转移等的相关性,验证它们作为患者预后评判指标的可行性,初步探讨CTC及CTSC与肿瘤转移的相关性。方法:本论文入组首诊初治结直肠癌患者50人,在其手术治疗前,以及治疗后一周各抽取外周血15ml,利用Ficoll淋巴细胞分离液分离出外周血单个核细胞后,平均分成两份: CTC组标记表面标记物--CD45、EpCAM、CK,CTSC组标记表面标记物--CD45、EpCAM、CD44、CD133,并利用超高速流式细胞分选仪MOFLO XDP进行CTC及CTSC的检测分析。结果:判定CD45-/EpCAM+/CK+细胞为CTC,CD45-/EpCAM+/CD44+细胞为CTSC1, CD45-/EpCAM+/CD133+细胞为CTSC2,CD45-/EpCAM+/CD44+/CD133+细胞为CTSC3。判定手术前(手术后)检测出CTC≥2个/7.5ml外周血者为阳性结果,CTC<2则为阴性;CTSC1≥1个/7.5ml外周血者为阳性结果,则CTSC1<1为阴性;CTSC2≥1个/7.5ml外周血者为阳性结果,则CTSC2<1为阴性;CTSC3≥1个/7.5ml外周血者为阳性结果,CTSC3<1为阴性。结果显示:(1)结直肠癌患者手术前CTC阳性检出率为34%,CTSC1阳性检出率为44%,CTSC2检出率为4%;手术后CTC阳性检出率为38%,CTSC1阳性检出率为54%,CTSC2阳性检出率为6%,均较术前增高但并不具有统计学意义;手术前后的样本均未检测出CD44、CD133双阳的细胞,CTSC3阳性检出率为0%。(2)手术前CTC与肿瘤的大小、T分期(浸润深度)有关(P均小于0.05),与患者年龄、性别、TNM分期、N分期及M分期都不具有显著相关性;而手术后CTC则与肿瘤的T分期、N分期(淋巴结转移)、M分期(远处转移)均具有显著相关性(P均小于0.05),与患者年龄、性别、肿瘤大小、TNM分期不具有显著相关性。(3)手术前CTSC1与肿瘤的T分期有关(P<0.05),与患者年龄、性别、肿瘤大小、TNM分期、N分期及M分期都不具有显著相关性;而手术后CTSC1则与患者年龄、性别、肿瘤大小、TNM分期、T分期、M分期及N分期均无显著相关性(P>0.05)。(4)综合术前、术后CTC、CTSC1的指标与肿瘤的TNM分期和M分期具有显著相关性(P<0.05),与N分期也有一定的相关性(P=0.063)。结论:(1)CTC与肿瘤的浸润深度、淋巴结转移及远处转移密切相关。(2)CTSC1与肿瘤的浸润深度具有相关性。CD44作为结直肠癌CTSC的检测指标优于CD133。(3)CTSC的检测可能是CTC检测的有益补充。
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