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目的：本课题旨在观察磁性纳米四氧化三铁(Magnetic Nanoparticle of Fe3O4，MNPs-Fe3O4，MNPs)、汉黄芩素(wogonin，Wog)以及柔红霉素(Daunorubicin，DNR)三者共聚合对K562/A02细胞多药耐药(Multidrug resistance，MDR)的影响及作用机制，为体内和临床试验提供重要的理论和实验依据。 方法：(1)应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法分析DNR、MNPs，Wog、DNR联合Wog、MNPs共聚合DNR，MNPs共聚合DNR和Wog分别作用于K562/A02细胞24h、48h及72h之后的细胞生长抑制情况；(2)采用透射电镜(Transmission Electron Microscope，TEM)和普鲁士蓝染色法(Prussian blue staining)观察MNPs在细胞内的位置分布及形态特征；(3)应用流式细胞术(flow cytometry，FCM)检测不同分组药物作用48h后K562/A02细胞的凋亡率及细胞内柔红霉素浓度；(4)采用RT-PCR法检测K562/A02细胞及各用药组作用48h后基因mdr1的mRNA表达水平；(5)采用Western blot法检测K562/A02细胞及各用药组细胞P-gp表达水平。 结果：(1)MTT结果示作用K562/A02细胞株48h后，Wog在0-40μmol/L，MNPs在0-0.4(v：v)均无明显的细胞生长抑制作用(生长抑制率<10％)，同时，DNR，DNR+Wog，DNR-MNPs及DNR-Wog-MNPs共聚物组对K562/02细胞均表现生长抑制作用，呈时间依赖性和浓度依赖性。DNR，DNR+Wog，DNR-MNPs及DNR-Wog-MNPs共聚物组48h的DNR IC50值分别为34.84±3.11μmol/L、7.19±0.65mμmol/L、8.94±0.82μmol/L、3.93±0.33μmol/L；(2)透射电镜结果显示0.1(v：v)的MNPs作用细胞后存在于吞饮小泡中，对细胞形态无明显影响，单个MNP电镜下测得直径为16.72±1.37nm，普鲁士蓝染色显示0.1(v：v)的MNPs作用K562/A02细胞48小时后，100％的细胞中有呈蓝染颗粒纳米粒子团；(2)流式细胞仪检测各用药组48h凋亡率结果示2μmol/L DNR和20μmol/L Wog及0.1(v：v)MNPs与对照组间无明显差别(P>0.05)，DNR+Wog，2μmol/LDNR-MNPs及2μmol/L DNR-Wog-MNPs共聚物凋亡率较其他组明显升高，具有统计学意义(P<0.05)，并且DNR-Wog-MNPs共聚物组凋亡率较其余各组均明显升高(P<0.05)；(3)流式细胞仪检测各用药组48h后，DNR+Wog、DNR-MNPs及DNR-Wog一MNPs两组K562/A02细胞内柔红霉素浓度较DNR单药组明显升高(P<0.05)，DNR-Wog-MNPs较DNR+Wog组柔红霉素荧光比值高(P<0.05)；(4)RT-PCR法检测K562/A02细胞及各用药组作用48h后mdr1 mRNA的表达水平，结果示，较空白对照组Wog组的下调率为44.85％±3.89％，DNR+Wog组为59.13％±3.48％，DNR-Wog-MNPs组为75.80％±4.32％(P<0.05)；(5)Westernblot法检测K562/A02细胞及各用药组作用48h后，较空白对照组P-gp在Wog组的蛋白表达抑制率为40.62％±2.57％，DNR+Wog组为69.93％±4.63％，DNR-Wog-MNPs组为79.51％+4.48％(P<0.05)。 结论： 1)MNPs以胞吞作用进入K562/A02细胞，48小时100％的细胞内均可见蓝染的铁粒子； 2)DNR-Wog-MNPs作用于K562/A02细胞可发挥显著的细胞毒作用，其IC50值较其他组(DNR、DNR+Wog、DNR-MNPs)明显降低； 3)DNR-Wog-MNPs显著诱导K562/A02细胞凋亡，凋亡率较其他组明显升高； 4)DNR-Wog-MNPs作用K562/A02细胞48小时后，细胞内柔红霉素荧光强度显著高于其余各组； 5)DNR-Wog-MNPs作用K562/A02细胞48小时后，mdr1表达下调，较其余组显著降低； 6)DNR-Wog-MNPs作用K562/A02细胞48小时后，P-gp表达下调，较其余组显著降低。