沙棘多糖的提取、分离纯化工艺研究

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本文以沙棘为原料,通过常规热水提取、超声波辅助提取和微波辅助提取,酶法提取四种方法,进行正交试验,得出最优提取工艺。并采用乙醇沉淀,正丁醇、三氯乙酸以及正丁醇-三氯乙酸法去蛋白,以及DEAE-52柱层析对多糖进行分离纯化,聚丙烯凝胶电泳和SephadexG-100凝胶柱层析证实为单一组分。研究结果表明:1.传统热水法提取沙棘多糖的最佳工艺为提取温度90℃,提取时间2h,料液比1:30,提取沙棘含量为13.96mg/g。微波辅助提取沙棘多糖的最佳工艺为微波功率100W,微波处理时间5min,料液比1:30,提取多糖含量为11.96mg/g。超声波辅助提取沙棘多糖的最佳工艺为超声波功率120W,超声时间45min,温度40℃,料液比1:30,提取多糖含量为14.36mmg/g。酶法提取沙棘多糖的最佳工艺为提取温度50℃、料液比1:30、时间45min、PH值4.5,在此条件下提取多糖含量为11.26mg/g。综合分析各种因素,超声波辅助提取为最优提取方法。2.沙棘多糖的粗提物经醇沉后,采用正丁醇、三氯乙酸以及正丁醇-三氯乙酸法去蛋白,并对其三种方法的去蛋白效果进行比较,结果表明:采用sevage法(正丁醇:三氯乙酸=1:4)效果最佳,其多糖损失率和蛋白去除率都在理想范围内,多糖损失率为33.23%,蛋白质去除率为73.53%。3.经去蛋白并透析后的多糖溶液过DEAE-52柱层析纯化后,得到两种多糖(PM1和PM2),经SephadexG-100凝胶柱层析、聚丙烯凝胶电泳和冻融分析证实其均为单一组分。
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