IL-17在人芽囊原虫感染小鼠过程中作用的初步研究

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目的:研究小鼠感染人芽囊原虫(Blastocystis hominis.B.h)后不同时间点的外周血中白细胞介素17(Interleukin17.IL-17)水平的动态变化及IL-17和白介素23(Interleukin23,IL-23)在小鼠肠道组织中的表达情况,从而探讨细胞因子IL-17在B.h感染免疫应答过程中的功能和机制以及与IL-23在B.h感染过程中的相互关系,为进一步阐明人芽囊原虫病发生、发展规律、致病机制和治疗提供新的依据与思路。方法:IMDM培养基培养人芽囊原虫,BABL/C小鼠120只随机分为实验组、免疫抑制剂组和对照组,每组40只,实验组小鼠经口感染人芽囊原虫,107个/鼠,免疫抑制剂组小鼠和对照组小鼠经口灌服等量生理盐水,SPF条件饲养。三组小鼠分别于感染后第2、3、4、5、6、7、8、10、12和14d各处死4只,取外周血,采用酶联免疫法(ELISA)检测不同时间点各组小鼠外周血中IL-17的表达水平;同时取感染后第5d的三组小鼠十二指肠、空肠、回肠和结肠制作成组织切片,用免疫组化法(IHC)检测各肠粘膜中IL-17和IL-23的表达,比较三组小鼠不同肠粘膜组织中的细胞因子表达水平有无差异。结果:酶联免疫法检测结果显示,免疫抑制剂组和对照组小鼠血清中工L-17的含量在不同时间点均维持较低水平,且在同一感染时间点两组小鼠血清中工L-17的表达水平差异无统计学意义(P>0.05):而实验组小鼠血清中IL-17水平随着感染时间推移而逐渐升高,并在第5d升至水平峰值达18.84±2.74pg/m1,随后逐渐下降,第8d后趋于正常表达水平。与免疫抑制剂组和对照组比较,实验组小鼠血清IL-17表达水平在感染第4d、5d、6d均显著升高,且差异有统计学意义(P<0.05),其余时间点上的表达差异无统计学意义(P>0.05)。小鼠肠道组织免疫组化染色显示,IL-17和工L-23的阳性细胞主要分布于肠粘膜固有层,在上皮细胞和粘膜肌层偶见表达,且阳性染色主要位于细胞质内。IL-17和IL-23在实验组小鼠不同肠粘膜中(十二指肠、空肠、回肠和结肠)的表达均显著高于免疫抑制剂组和对照组,差异有统计学意义(P<0.05),免疫抑制剂组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。IL-17在实验组小鼠十二指肠、空肠、结肠粘膜中的表达水平均高于回肠粘膜,差异有统计学意义(P<0.05),而十二指肠、空肠、结肠粘膜间两两比较差异无统计学意义(P>0.05)。IL-23在实验组小鼠十二指肠、空肠粘膜中的表达水平分别高于回肠和结肠粘膜,差异有统计学意义(P<0.05),而十二指肠与空肠粘膜间比较差异无统计学意义(P>0.05),回肠与结肠粘膜间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:1.IL-17在感染人芽囊原虫小鼠外周血和肠粘膜组织中均有高表达,提示IL-17参与了人芽囊原虫感染的免疫调节作用,并在感染的早期就发挥了重要的抗虫作用,同时也导致了机体产生一定的病理损害;2.IL-23在感染人芽囊原虫小鼠肠粘膜中亦有高表达,与IL-17的表达结果有相似之处,提示IL-23亦可能参与了人芽囊原虫感染的免疫反应,推测IL-23与工L-17在人芽囊原虫感染的免疫应答过程中有一定的相互调节作用。
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