集胞藻PCC6803中未知蛋白与四吡咯色素蛋白的初步研究

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集胞藻PCC6803的基因组测序已经完成,并且对其基因功能的研究也取得了很大的进展,但是该藻种中仍然存在着许多未知的功能基因。为了研究未知功能基因,本实验室构建了集胞藻PCC6803的突变体⊿sll0272、⊿sll0524、⊿sll0584、⊿sll0781、⊿sll0939、⊿slrl614、⊿slr1618、⊿slr1674、⊿slr1702以及⊿slr0280。本论文中,我们研究了这些基因的缺失对集胞藻PCC6803生理活性(不同培养条件下的生长情况)的影响。研究结果表明:⊿sll0272的生长同环境中Na+与K+的浓度有关,尤其是在低盐条件,同Na+/K的比率有关,比率越大生长越快。同时发现集胞藻PCC6803缺失了slr0280后,糖代谢受到了明显的影响。而其它8个突变体与野生型比较,生长情况没有明显差别。   OprB是一种选择性转运糖的孔蛋白,集胞藻PCC6803含有6个与OprB同源的孔蛋白,分别由sll0772、sll127l、sll1550、slr0042、slr1841、slr1908编码,可能负责糖的选择性转运。本论文中,我们通过同源双交换技术,分别缺失sll0772、sll1271和sll1550,并且用卡那霉素抗性基因替换,得到了突变体⊿sll0772、⊿sll1271以及⊿sll1550。通过对集胞藻PCC6803野生型与各突变体生理活性的比较,发现在缺元素(C、N、P)以及不同碳源(葡萄糖、蔗糖、丙酮酸钠、柠檬酸钠)培养条件下,野生型与各突变体的生长情况都没有明显的差别。   光动力学疗法是一种治疗癌症的新方法,蓝细菌藻胆蛋白和光敏色素在光照射下可能产生光毒性,具有成为光疗药物的潜力。本论文中,我们对23个藻胆蛋白和光敏色素进行了光毒性实验,检测它们的光毒性活性,发现PecB-CpcT-PCB的光毒性效果最好,致死率约为22%。但是这种程度的光毒性效应并没有达到我们预期的目标,需要继续进行筛选,期望获得一个或多个具有高光毒性的藻胆蛋白或光敏色素。
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