李属种质资源的RAPD指纹图谱分析

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李属(prunus)(包括李、杏)种质材料作为一种经济型核果树种,经过不断的进化和培育,已经形成了丰富的李属种质资源。李属种质资源遗传多样性的研究,便于其品种资源的搜集、留存、判定和合理利用。本研究选用RAPD分子标记技术构建20个李属材料的指纹图谱,对其亲缘关系进行聚类分析,并且对CID这种新方法进行了初探,对于相似品种鉴定的研究,可以选用合适的引物,利用CID图谱做更进一步的区分,证实了这种新方法使品种区分变得简单、有效、可靠、实用,这对园艺领域品种权益的保护是非常有意义的。本实验研究结果如下:1.采用SDS法、CTAB法、一步法三种方法提取供试材料的基因组DNA,结果表明:改良CTAB法提取效果最好;分别提取供试材料的叶片及新鲜嫩芽,结果表明:提取新鲜嫩芽获得的基因组DNA质量好、浓度高、RAPD扩增条带清晰。2.参考已经发表的核果类果树的相关研究成果,对RAPD-PCR的部分因素进行了优化设计,建立一套适用于李属材料的RAPD反应体系。3.分别从20条RAPD随机引物(10-mer)中,筛选出多态性高,条带清晰的6条RAPD随机引物进行数据分析。6条随机引物共扩增出234条谱带,其中208条具有多态性,多态性比率为88.9%,每一个引物可扩增1至7条多态性条带。根据扩增出来的谱带构建0、1矩阵,选用UPGA法对20份供试样品进行了聚类分析,结果表明:RAPD标记揭示了李属种质材料间遗传距离变化范围在0.05-0.50,平均值0.28。以遗传相似系数0.72为分界点,将20份李属材料大致分为六类。4.利用RAPD随机引物Y18(11-mer)的扩增结果,构建了20个李属材料的CID指纹图谱。
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